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目的:研究左氧氟沙星(Levofloxacin, LVFX)对体外培养兔滑膜细胞的影响,并探讨其作用机制。方法:原代培养家兔膝关节滑膜细胞,免疫细胞化学法鉴定滑膜细胞。设立正常对照组及梯度浓度的左氧氟沙星处理组(5、10、20、40和80μg/ml)分别作用24和48小时。以MTT法检测细胞增殖能力,酶联免疫法测试透明质酸(hyaluronic acid, HA)的浓度,透射电镜观察细胞超微结构,流式细仪检测细胞的凋亡,相对定量PCR检测滑膜细胞内白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1),白细胞介素-6(Interleukin-1,IL-6),透明质酸合成酶-2(hyaluronan synthase-2,HAS-2)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA水平表达,免疫细胞化学法检测细胞内Caspase-3和Ⅱ型胶原的蛋白水平表达。结果:①培养的细胞具有成纤维细胞样形态和特征,免疫组化染色示vimentin阳性,CD68阴性,纯度达98％以上,符合B型滑膜细胞特点。②MTT法检测细胞增殖能力示:左氧氟沙星可抑制滑膜细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性。③酶联免疫法检测培养液中的透明质酸的浓度示:左氧氟沙星有降低滑膜细胞分泌透明质酸的作用。④细胞透射电镜观察,与正常滑膜细胞相比,给药组滑膜细胞胞浆出现大量空泡和巨大囊泡样改变,内质网增多及肿胀,细胞膜空泡形成。⑤流式细仪检测细胞的凋亡示:左氧氟沙星可诱导滑膜细胞凋亡,细胞凋亡数呈药物浓度依耐性升高。⑥相对定量PCR检测示:与对照组相比,实验组中的 IL-1,IL-6和HAS-2的mRNA表达呈药物浓度依耐性降低;而TNF-α的mRNA表达呈药物浓度依耐性增加。⑦细胞免疫化学检测示:与对照组相比,实验组中的Caspase-3的表达呈浓度依耐性增加;而II型胶原蛋白的表达呈浓度依耐性降低。结论:左氧氟沙星对家兔的滑膜细胞具有毒性作用,表现为抑制滑膜细胞增殖和促进凋亡,降低其分泌透明质酸的功能,抑制其合成II型胶原及分泌IL-1,IL-6;左氧氟沙星促进滑膜细胞调亡的机制可能是激活Caspase-3及TNF-α的表达,而抑制滑膜细胞合成透明质酸的机制可能是抑制透明质酸合成酶HAS-2的表达。这些研究可指导氟喹诺酮类抗生素的临床用药,有望为滑膜损伤及预防提供理论支持。