【摘 要】
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目的:蛋白激酶A (protein kinase A,PKA)在血小板信号转导和粘附、聚集、释放等多种生理功能的发挥中均起到重要的作用,血小板内一定量的PKA基础活性是维持循环血小板静息状态的必要条件.对有核细胞的研究发现,PKA调控细胞凋亡的方式与细胞类型有关,本研究的目的是探讨PKA在血小板凋亡中的作用及其信号转导机制.方法:取健康志愿者外周静脉血,分离血小板.利用蛋白激酶A抑制剂H89、PK
【机 构】
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苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,卫生部血栓与止血重点实验室 215007
【出 处】
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中华医学会第15次全国血栓与止血学术会议
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目的:蛋白激酶A (protein kinase A,PKA)在血小板信号转导和粘附、聚集、释放等多种生理功能的发挥中均起到重要的作用,血小板内一定量的PKA基础活性是维持循环血小板静息状态的必要条件.对有核细胞的研究发现,PKA调控细胞凋亡的方式与细胞类型有关,本研究的目的是探讨PKA在血小板凋亡中的作用及其信号转导机制.方法:取健康志愿者外周静脉血,分离血小板.利用蛋白激酶A抑制剂H89、PKI等多种抑制剂,借助流式细胞术、western-blot、RNA干扰等方法处理血小板,检测血小板凋亡和活化标志物,以及血小板膜糖蛋白GPⅠbα酶切的变化.结果:血小板内PKA活性被抑制可诱导血小板膜磷脂酰丝氨酸外翻,细胞内线粒体膜电位去极化、caspase-3蛋白活化,以及细胞骨架蛋白gelsolin降解等改变;而另一方面,抑制血小板内蛋白激酶A活性不会影响血小板P-选择素的表达和GPⅡb/Ⅲa的活化.在探讨其诱导血小板凋亡的机制中发现,PKA抑制引起的血小板凋亡与血小板内活性氧族(ROS)有关,而与钙离子浓度、calpain活性以及线粒体膜孔道蛋白(MPTP)无关.
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