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目的:明确清胰化积方(QYHJ)是否通过下调SKI表达抑制SW1990胰腺癌细胞的生长。
方法:通过实时定量PCR和western blot技术检测QYHJ治疗后SW1990皮下移植瘤SKI mRNA和蛋白表达变化;通过慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术建立SKI低表达SW1990细胞系,并通过实时定量PCR和western blot技术对其干扰效率进行验证;评价SKI不同表达SW1990皮下移植瘤对QYHJ治疗的反应性。最后,通过体内、外增殖实验和流式细胞技术确定SKI对人胰腺癌细胞SW1900细胞体内、外生物学行为的影响。
结果:OYHJ治疗后SW1990皮下移植瘤SKI mRNA和蛋白与未用QYHJ治疗组比较分别下降了39.6%和41.3%;然后建立了SKI低表达SW990细胞系(SW1990/SKI RNAi)和阴性干扰细胞系(SW1990/conRNAi)。其SKI mRNA和蛋白表达量分别是亲代细胞的105%、123%和46%、30%;SW1990细胞和SW1990/con RNAi细胞皮下移植瘤应用QYHJ治疗后其瘤重抑制率分别为29.6%和32.2,但SW1990/RNAi细胞组其瘤重抑制率为16.0-17.8%。其次,SKI低表达在体外增加了1990细胞对TGF-β1诱导的增殖抑制作用的敏感性,流式细胞分析显示SKI干扰后SW1990细胞G1期比例由40.4%上升至62.9%;体内研究显示SKI干扰后SW1990皮下移植瘤生长速度明显低于对照组(P<0.05)。
结论:QYHJ通过下调SKI表达抑制人胰腺癌细胞SW1990细胞的生长,其不同表达介导了SW1990细胞对QYHJ治疗的不同反应。