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目的 应用慢病毒介导的shRNA干扰技术,通过筛选建立稳定表达β4整合素shRNA的非小细胞肺癌H460SM细胞,抑制H460SM细胞β4整合素的表达,体外实验研究β4整合素在非小细胞肺癌H460SM细胞生长和转移中的作用,为非小细胞肺癌早期诊断和治疗提供新的靶点.方法 实时定量RT-PCR验证β4整合素表达水平的变化,显微镜下观察细胞形态的变化.通过细胞计数和MTS实验分析抑制β4整合素表达对H460SM细胞增殖的影响;软琼脂实验分析抑制β4整合素表达对H460SM细胞非锚定依赖性生长的影响;流式细胞术分析抑制β4整合素表达对H460SM细胞凋亡和细胞周期的影响;侵袭实验评估抑制β4整合素表达对H460SM细胞体外迁移和侵袭能力的影响.结果 与阴性对照组(H460SM-NS)比较,稳定表达β4整合素shRNA的实验组(H460SM-68、H460SM-71)细胞β4整合素表达水平明显降低(P<0.01);与阴性对照组比较,实验组细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05);与阴性对照组比较,抑制β4整合素表达能够抑制H460SM细胞的锚定非依赖性生长,降低H460SM细胞的致瘤性(P<0.05);实验组细胞凋亡率与阴性对照组比较差异没有统计学意义(P>0.05).实验组细胞增殖指数PI明显低于阴性对照组(p<0.05),G0/G1期细胞数明显高于阴性对照组(P<0.05),提示抑制β4整合素的表达,细胞周期可能被阻滞在G1/S检测点,导致细胞增殖受到抑制;实验组细胞迁移率和侵袭率明显低于阴性对照组(P<0.05)结论 成功构建了稳定表达β4整合素shRNA的非小细胞肺癌H460SM细胞.抑制β4整合素的表达,可以抑制非小细胞肺癌细胞增殖和非锚定依赖性生长,癌细胞增殖受到抑制可能与细胞周期调控有关.抑制β4整合素的表达,可能不影响非小细胞肺癌细胞凋亡.抑制β4整合素的表达,可以抑制非小细胞肺癌细胞侵袭和转移.