【摘 要】
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目的 使用计算机辅助精液分析和流式细胞分析仪,比较经上游法处理前后、孕酮诱导上游法处理前后精子的精子线粒体相对活性以及精子内ROS含量的变化,找到受精精子的线粒体功能特点.材料与方法 收集具有正常人类精子(达到《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第五版标准),利用"上游法"上游1小时,获得前向运动能力较好的精子.这些精子继续在37℃和5％二氧化碳培养箱中,使用"孕酮诱导"上游法,获得孕酮诱导
【机 构】
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上海市第一妇婴保健院生殖医学中心 上海交通大学医学院附属仁济医院人类精子库
【出 处】
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中华医学会第七次全国生殖医学学术会议
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目的 使用计算机辅助精液分析和流式细胞分析仪,比较经上游法处理前后、孕酮诱导上游法处理前后精子的精子线粒体相对活性以及精子内ROS含量的变化,找到受精精子的线粒体功能特点.材料与方法 收集具有正常人类精子(达到《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第五版标准),利用"上游法"上游1小时,获得前向运动能力较好的精子.这些精子继续在37℃和5％二氧化碳培养箱中,使用"孕酮诱导"上游法,获得孕酮诱导超激活运动精子,对照组为未经上游法处理精子和普通上游精子.分别使用线粒体膜电位特异性染色剂JC-1和活性氧自由基(ROS)染色剂DCF,标记人类精子线粒体活性和ROS总量.结果 正常人类精子经上游处理及经孕酮诱导后,线粒体相对活性(高活性线粒体/低活性线粒体比值)显著上升;线粒体活性均衡(含有等量高膜电位和低膜电位的线粒体)精子的比例显著降低;精子细胞内ROS同时在精子的头、颈、尾部出现,获能后精子ROS产量显著低于获能前精子;孕酮诱导法获得的精子,其ROS产量与获能后没有差别.经孕酮诱导法获得的精子,与非诱导法获得的精子相比,线粒体活性较低;含均衡线粒体较多;产生较少的ROS,但是差异并不显著.结论 人类精子"获能"后,伴随着线粒体相对活性的提升;而进一步的孕酮诱导,虽然精子向前运动速度显著提高,但是线粒体相对活性并没有随着运动速度的提高而继续增加.而ROS产生的数量,并不因线粒体的活性增强而增加.
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