麦二叉蚜唾液蛋白C002基因不同组织及不同龄期表达谱分析

来源 :中国植物保护学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:FlyinginSky
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  蚜虫为农业重大害虫之一,属刺吸式害虫,通过刺吸植株汁液及传播病毒病对寄主作物的产量和品质造成严重为害.蚜虫唾液在蚜虫一寄主植株互作关系中起重要的作用,如参与蚜虫口针在对寄主植物的穿刺过程中的口针鞘的形成,寄主植物营养物质的消化吸收,诱导或抑制植株的防御反应,以及传播植物病毒病等.蚜虫唾液相关蛋白C002是一种水溶性蛋白,已有报道参与蚜虫的取食过程,是取食必需蛋白,但其作用机理未知.本研究通过基因克隆及RACE技术获得麦二叉蚜唾液蛋白C002的cDNA全长,命名为SgC002(GenBank登录号:KC977563),并运用Real-time PCR分析该基因在蚜虫不同组织及不同龄期的表达谱,进一步了解SgC002基因特性及为后续C002功能研究奠定基础.分别切取麦二叉蚜有翅成蚜的头、胸、腹、唾液腺、肠、去除唾液腺的头部6个部位,不同若蚜龄期(1 -4龄)、有翅型和无翅型整蚜为实验材料,利用实时荧光定量PCR技术检测目的基因SgC002在麦二叉蚜不同组织、龄期及翅型中的相对表达量.实验结果表明,SgC002基因在蚜虫头、胸、腹、肠以及无唾液腺的头部中基本无表达,在蚜虫唾液腺中的相对表达量极显著高于其他5个部位(P<0.01),属唾液腺特异表达基因.1龄若蚜表达量最低,2龄时表达量迅速上升且极显著高于其他龄期(P<0.01),到3、4龄表达量逐渐下降,至成蚜时表达量又有所上升.无翅成蚜SgC002的相对表达量极显著高于有翅成蚜,约为有翅成蚜表达量的7倍.SgC002在麦二叉蚜与小麦互作关系中作用,拟通过原核表达、原位杂交、免疫共沉淀及RNAi等技术进行深入研究.
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