葎草(Humulus.L)花粉变应原蛋白组分分析及蛋白含量测定

来源 :首届国际中西医结合变态反应学术会议暨全国中西医结合变态反应第三次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jhiphop
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目的:葎草(Humulus. L)花粉目前已成为中国夏秋季花粉症主要致敏原之一。本次课题专门针对辽沈地区葎草花粉变应原进行了研究,对葎草花粉变应原进行分离、提纯、蛋白组分分析及蛋白含量测定,筛选其主要蛋白。方法:以自然脱落法采集葎草花粉,按常规方法制备葎草花粉变应原浸液,经SDS-PAGE,测量标准蛋白和样品蛋白的迁移距离,求出葎草花粉变应原各蛋白组分的相对分子量。采用传统的凯氏定氮法和考马斯亮蓝G-250染色两种方法,测定出葎草花粉中总的蛋白含量。结果: SDS-PAGE电泳结果可见6条明显区带,分子量分别为87,66,46.8,30,23,16.6kD,其中23kD的蛋白区带颜色较深。凯氏定氮法和考马斯亮蓝染色法测得葎草花粉蛋白含量分别为5.35mg/g和2.05mg/g。结论:葎草花粉变应原含有6种主要蛋白成份,分子量分别为87,66,46.8,30,23,16.6kD,其中23kD的蛋白区带颜色深,提示含量较高。不同方法测葎草花粉蛋白含量为5.35mg/g和2.05mg/g,差别较大,提示凯氏定氮法因检测蛋白同时,还有其他含氮化合物参与反应,因此不如考马斯亮蓝染色法准确,葎草花粉蛋白含量应为2-3mg/g。
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