【摘 要】
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雷公藤内酯醇(Triptolide)是多年生卫矛科植物雷公藤(Tripterginum Wilfordii Hook.F)的主要活性成分之一,具有抗炎、抗肿瘤、免疫抑制等多种活性受到了全世界的关注.雷公藤
【机 构】
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南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏 南京 210093
【出 处】
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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议
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雷公藤内酯醇(Triptolide)是多年生卫矛科植物雷公藤(Tripterginum Wilfordii Hook.F)的主要活性成分之一,具有抗炎、抗肿瘤、免疫抑制等多种活性受到了全世界的关注.雷公藤内酯酮(Triptonide)和雷公藤内酯三醇(Triptriolide)同样是雷公藤的提取物,与雷公藤内酯醇结构相似都属于二萜类三环氧内酯化合物.三种化合物被报道具有很多的生物功能或细胞学毒性,但是他们作用的分子机制特别是他们直接的作用靶点仍然很不明确.在本论文中利用计算机反向模拟对接技术将三个化合物对接到多个核受体类蛋白(NRS)的活性位点上,以确定其潜在的靶点.通过对接发现多个核受体蛋白具有潜在的结合可能,其中雌激素受体α(Estrogen Receptorα,ERα)相对得分较高.进一步实验,利用体外重组表达技术将ERα配体结合域(ERα-LBD)在大肠杆菌中表达.利用俩种无标记亲和力检测方法:等温滴定量热(Isothermal Titration Calorimetry,ITC)和表面等离子共振(Surface Plasma Resonance,SPR)检测了三种小分子与ERα-LBD的亲和情况.结果显示:三种小分子与ERα-LBD都具有亲和性,属于弱相互作用.同时,利用体内报告基因检测方法表明:在ER阴性HepG2细胞内瞬时转染ER过表达质粒和含雌激素反应元件(Estrogen Response Element,ERE)的报告基因质粒ERE-luc后.与对照比内酯醇和内酯酮能够明显诱导荧光素酶基因的表达.
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