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目的:通过观察电磁脉冲(Electromagnetic pulse,EMP)、S波段高功率微波(S-band high power microwave,S-HPM)、X波段高功率微波(X-band high power microwave,X-HPM)三种不同波段电磁辐射对Raji细胞内Ca2+浓度、Caspase-3蛋白表达的影响及两者之间的相互关系,探讨电磁辐射致免疫损伤的相关调控机制。
方法:常规培养Raji细胞,分别用S-HPM、X-HPM和EMP三种不同波段的电磁辐射照射对数生长期Raji细胞4mins,设空白照射为对照组.于照射后6h收集细胞,分为两部分,一部分采用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+浓度的改变,ca2+浓度的大小以ca2+荧光强度的OD值表示;另一部提取总蛋白,采用Western Blot技术检测细胞内Caspase-3蛋白的表达,图像分析技术检测阳性条带的积分光密度OD值,用Caspase-3蛋白阳性条带的积分光密度OD值与其对应内参照的β-action蛋白阳性条带的积分光密度OD值的比值代表Caspase-3蛋白的半定量值;所得数据分别用SPSS 13.0软件中单因素方差分析的LSD、Dunmett检验进行统计学分析,Ca2+浓度与Caspase-3蛋白表达的关系用线性回归分析进行统计学处理。
结果:激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示Ca2+荧光呈绿色,分布于Raji细胞浆内,易于辨认.与对照组相比较,各实验组Raji细胞Ca2+荧光强度OD值均明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);蛋白印迹检测结果清晰显示Caspase-3蛋白阳性条带,与对照组相比较,各实验组Raji细胞Caspase-3蛋白阳性条带的半定量值均明显大于对照组,差异显著(p<0.01);各实验组Ca2+浓度增加和Caspase-3蛋白表达上调具有一致性,线性回归分析结果显示Caspase-3蛋白的表达随着Ca2+浓度的增加而上调,二者的相关性难以判定(R2值<0.1,p值均<0.01)。
结论:EMP、X-HPM和S-HPM三种不同波段电磁辐射均可导致Raljii细胞Ca2+浓度增加和Caspase-3蛋白表达上调,提示Cd2+浓度和Caspase-3蛋白在电磁辐射致Raji细胞损伤中具有重要作用:Caspase-3蛋白的表达上调与Ca2+浓度增加具有一致性,二者的相关性难以判定,其相关机制有待进一步研究。
方法:常规培养Raji细胞,分别用S-HPM、X-HPM和EMP三种不同波段的电磁辐射照射对数生长期Raji细胞4mins,设空白照射为对照组.于照射后6h收集细胞,分为两部分,一部分采用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+浓度的改变,ca2+浓度的大小以ca2+荧光强度的OD值表示;另一部提取总蛋白,采用Western Blot技术检测细胞内Caspase-3蛋白的表达,图像分析技术检测阳性条带的积分光密度OD值,用Caspase-3蛋白阳性条带的积分光密度OD值与其对应内参照的β-action蛋白阳性条带的积分光密度OD值的比值代表Caspase-3蛋白的半定量值;所得数据分别用SPSS 13.0软件中单因素方差分析的LSD、Dunmett检验进行统计学分析,Ca2+浓度与Caspase-3蛋白表达的关系用线性回归分析进行统计学处理。
结果:激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示Ca2+荧光呈绿色,分布于Raji细胞浆内,易于辨认.与对照组相比较,各实验组Raji细胞Ca2+荧光强度OD值均明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);蛋白印迹检测结果清晰显示Caspase-3蛋白阳性条带,与对照组相比较,各实验组Raji细胞Caspase-3蛋白阳性条带的半定量值均明显大于对照组,差异显著(p<0.01);各实验组Ca2+浓度增加和Caspase-3蛋白表达上调具有一致性,线性回归分析结果显示Caspase-3蛋白的表达随着Ca2+浓度的增加而上调,二者的相关性难以判定(R2值<0.1,p值均<0.01)。
结论:EMP、X-HPM和S-HPM三种不同波段电磁辐射均可导致Raljii细胞Ca2+浓度增加和Caspase-3蛋白表达上调,提示Cd2+浓度和Caspase-3蛋白在电磁辐射致Raji细胞损伤中具有重要作用:Caspase-3蛋白的表达上调与Ca2+浓度增加具有一致性,二者的相关性难以判定,其相关机制有待进一步研究。