【摘 要】
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目的：探讨、优化基于环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测常规食品中感染性痢疾志贺氏菌的方法,并应用于实际样品检测研究.
方法：在
【机 构】
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广东环凯微生物科技有限公司,广东广州510663广东省微生物研究所广东广州510070
【出 处】
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2016第五届中国食品安全高峰论坛
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目的：探讨、优化基于环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测常规食品中感染性痢疾志贺氏菌的方法,并应用于实际样品检测研究.
方法：在NCBI数据库中搜索获取志贺氏菌的特异性基因高度保守区,并设计三对LAMP反应引物,进一步通过配方优化建立该LAMP可视化检测方法.评价其特异性、灵敏度,并与一般的PCR检测方法以及传统检测方法对比,进行统计分析.
结果：5株志贺氏菌标准菌株样品均检测为阳性,11株非志贺氏菌标准菌株样品均检测为阴性,无交叉反应.志贺氏菌标准菌株CMCC(B)51572菌悬液稀释倍数在1-106时,均检测为阳性,最低检验限为16CFU,且经比较,LAMP检测灵敏度比PCR检测高出1个数量级.通过对200份代表性食品进行检测,本LAMP检测与传统方法检测结果具有较高的一致性.
结论：本检测方法具有特异性好、灵敏度高、检测结果稳定、可靠等特点,适用于对常规食品中感染性痢疾志贺氏菌的高效、快速检测需求.
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