NRAGE对小鼠牙髓细胞增殖和分化的影响

来源 :2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lsydyn
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  目的:探讨神经生长因子受体介导的黑色素瘤抗原编码基因同源蛋白(Neurotrophin receptormediated MAGE homology,NRAGE)对小鼠牙髓细胞(mouse dental pulp cells, mDPCs)增殖和分化能力的影响.材料与方法:体外组织块法原代培养mDPCs并鉴定.mDPCs成牙本质体外诱导后,采用实时定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测NRAGE在细胞分化过程中的表达变化.构建NRAGE基因的特异性RNA干扰(shRNA)慢病毒载体并感染体外培养的mDPCs,获得稳定的NRAGE-shRNA mDPCs.实验分三组:NRAGE-shRNA慢病毒感染的mDPCs组(shRNG组),空慢病毒感染的阴性对照组(shCon组)和正常细胞的正常对照组(wt组).采用细胞生长曲线测定(Cell counting kit-8,CCK-8),检测NRAGE敲减后对mDPCs增殖能力的影响;对各组细胞行体外成牙本质分化诱导后,采用碱性磷酸酶(ALP)染色法和茜素红染色法分别检测ALP表达和矿化结节形成的差异,并检测ALP活性、RT-PCR检测诱导后各细胞组中分化相关基因ALP、牙本质基质蛋白-1(dental matrix protein-1,DMP1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)的mRNA水平;WB检测各组细胞分化过程中牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein, DSP)和DMP1蛋白表达水平.结果:在mDPCs分化过程中,NRAGE的mRNA和蛋白质表达水平逐渐下调.与shCon组和wt组相比,shNRG组细胞增殖能力显著降低;shNRG组诱导后ALP染色和矿化结节数量较wt组和shCon组明显增多,ALP、DSPP/DSP、DMP1的mRNA和蛋白表达水平较wt组和shCon组显著性增强(P<0.05).结论:NRAGE下调表达后,mDPCs的体外增殖受到抑制,mDPCs向成牙本质细胞的分化能力增强.研究结果提示,NRAGE对mDPCs的增殖和分化发挥着重要作用.
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社区康复又称为基层康复,基层康复的设立既方便了广大残疾人,使更多的残疾人受益的同时又培养了更多的合格基层卫生技术人员.根据残疾人的需求及基层卫生机构的职能、条件,为其提供相应的社区康复服务.基层康复使残疾人在后期康复过程中,尽早的康复回归社会.基层康复在残疾人康复过程中占有不可磨灭的作用,为残疾人康复事业奠下基础.
A significant treatment gapSince the late 1990s, there has been increasing evidence that disabilities caused by mental health problems areamong the most common of all disabilities at a global level.
本文介绍了社区康复的概念和目的,认为社区康复要从社会经济发展和残疾人康复需求的实际情况出发,在政府领导下,采取社会化工作方式,充分调动社区内一切可以利用的人力、物力、财力、文化等资源,为残疾人提供就近就便的康复医疗、训练指导、心理支持、知识普及、用品用具及康复客询、转介、信息等多种服务,逐步提高残疾人生活、学习、工作及参与家庭和社会活动的能力.
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目的:制备壳聚糖接枝聚乙烯亚胺(CS-PEI)共聚物载体,并复合BMP2基因促进骨组织再生。方法:利用高碘酸盐氧化的脱乙酰壳多糖(CS)和低分子量聚乙烯亚胺(PEIMW=1800)之间的亚胺反应来制备共聚物,并对其理化性质进行表征。利用CS-PEI/BMP2复合物转染MC3T3-E1细胞,通过流式细胞术检测其其转染效率及对细胞周期和凋亡的影响;通过realtime-PCR、茜素红染色和Wester