【摘 要】
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目的:Pmt1p和Pmt2p通过调节蛋白质翻译后的修饰和非折叠蛋白质的降解进而影响酵母细胞的生长和分裂.PMTs物种进化上高度保守,pomt1和pomt2突变与哺乳动物先天性肌营养不良密切相关,但有关PMT基因家族对细胞复制寿命调控的报道很少.方法:以基因同源重组为原理,构建PMT1缺失菌株和PMT1过表达菌株,PMT1与PMTs家族中其他基因的双基因缺失酵母株,及缺失PMT1环5的酵母菌株.显微
【机 构】
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广东省医学分子诊断重点实验室,东莞;广东医学院衰老研究所,东莞 广东省医学分子诊断重点实验室,东莞
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目的:Pmt1p和Pmt2p通过调节蛋白质翻译后的修饰和非折叠蛋白质的降解进而影响酵母细胞的生长和分裂.PMTs物种进化上高度保守,pomt1和pomt2突变与哺乳动物先天性肌营养不良密切相关,但有关PMT基因家族对细胞复制寿命调控的报道很少.方法:以基因同源重组为原理,构建PMT1缺失菌株和PMT1过表达菌株,PMT1与PMTs家族中其他基因的双基因缺失酵母株,及缺失PMT1环5的酵母菌株.显微镜下分离并计数酵母细胞出芽的个数.结果:与正常对照组比较,PMT1缺失酵母株的细胞复制寿命显著延长,PMT1过表达菌株的细胞寿命明显缩短.PMT1分别与PMT2和PMT5双基因缺失酵母株寿命显著缩短,Pmt1p跨膜结构域环5缺失菌株的复制寿命无明显变化.结论:PMT1基因在酵母细胞的复制寿命中有重要的作用,且其复制寿命的延长与丢失跨膜结构域环5引起的甘露糖转移酶活性缺失是不相关的.PMTs家族中主要复合体Pmt1p-Pmt2p或Pmt1p-Pmt5p的丢失会缩短酵母细胞的复制寿命.
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