【摘 要】
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本研究从已有血红扇头蜱miRNA数据库中筛选出与卵发育相关的miR-275基因，寻找调控靶基因的启动子等转录调控区域，预测靶标基因，采用RNA干扰及qRT-PCR方法对其真实性进行验证；PCR扩增靶标基因进行序列分析；选择功能区构建重组表达载体，进行体外原核表达及免疫反应的研究。
【机 构】
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兰州兽医研究所,兰州730046 河南农业大学牧医工程学院,郑州450002
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会
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本研究从已有血红扇头蜱miRNA数据库中筛选出与卵发育相关的miR-275基因，寻找调控靶基因的启动子等转录调控区域，预测靶标基因，采用RNA干扰及qRT-PCR方法对其真实性进行验证；PCR扩增靶标基因进行序列分析；选择功能区构建重组表达载体，进行体外原核表达及免疫反应的研究。
其他文献
本研究旨在从分子水平研究GnIH对卵巢颗粒细胞(GC)增殖的影响。以梯度浓度(0、10-6、10-8、10-10和10-12 mol/L)在体外培养猪的GC中加入GnIH,通过CCK-8法检测各组GC的活力；采用半定量RT-PCR方法分别检测各组GC增殖相关基因CyclinD1、CyclinA2、Cyc lin B、Cdk1、Cdk2和Cdk4 mRNA表达量。
Ca2+是细胞内的第二信使，是生命机体活动必不可少的离子之一，正常卵母细胞内的Ca2+会维持一个稳态。一些研究表明，细胞内Ca2+浓度的升高会加速细胞老化，去掉周围液体的钙离子，可以减缓细胞老化；而玻璃化冷冻会使卵母细胞透明带变硬、DNA损伤以及纺锤体异常等，冷冻过程中细胞内钙离子浓度异常是诱发这些损伤的重要原因。
为了探求对小鼠卵母细胞影响较小的玻璃化冷冻液配方，研究玻璃化冷冻小鼠卵母细胞透明带超微结构的变化本研究选用目前应用广泛的四种冷冻保护液配方对小鼠卵母细胞进行处理，观察经冷冻保护液处理后的小鼠卵母细胞与未处理的卵母细胞的存活率、受精率、卵裂率和囊胚率，选出对卵母细胞发育潜力影响相对较小的冷冻液配方；进一步对冷冻前后及仅经冷冻保护液处理的小鼠卵母细胞透明带做电镜扫描研究其透明带超微结构变化情况。
本实验以小鼠卵母细胞作为试验材料，通过透射电镜方法观察玻璃化冷冻对卵母细胞超微结构的影响，初步探讨玻璃化冷冻损伤机理。结果 发现：暴露组卵母细胞除有少量线粒体受到损伤，变得粗糙模糊外，其它均无明显变化；冷冻组卵母细胞冻融后有不同程度的结构损伤，主要为：胞质中的中间纤维解体；微绒毛变短甚至缺失；线粒体粗糙模糊；胞质外围皮质颗粒数量减少；透明带变得模糊不清，有的地方甚至已经破裂；细胞基质出现大量空泡。
为探讨米非司酮(RU486)对小鼠子宫组织中CD4+、CD8+淋巴细胞以及F4/80+巨噬细胞等免疫细胞数量变化和分布的影响，研究米非司酮致流产可能的细胞免疫机制，实验中对怀孕7d的小鼠颈部注射米非司酮，并在小鼠孕8d时采集子宫，应用SP法对小鼠子宫CD4+、CD8+T淋巴细胞及F4/80+巨噬细胞进行免疫组织化学染色，观察并统计一定面积内的免疫细胞数量及其分布。
为了研究环境水平三苯基锡(triphenyltin,TPT)对哺乳动物肾上腺的毒性作用,本试验将40只青春期SD大鼠随机分为3个不同剂量的试验组(0.5、5、50 μ g/kg)和1个对照组(0 μ g/kg).每3天灌胃一次,暴露54天后,用10％水合氯醛麻醉并处死大鼠,采用石蜡切片和HE染色的方法观察SD大鼠肾上腺组织学变化特点.
为了研究不同强度光照对母鸡大脑内GABA分布的影响,分别用0 lx(黑暗环境下),10 lx,20 lx,30 lx等不同强度的光照对120日龄母鸡进行光照刺激,采用免疫组化的方法检测GABA在大脑中的表达。结果 显示,大脑中有大量GABA免疫反应阳性神经元,主要见于新纹状体(N)、上纹状体腹侧(HV)、上纹状体附属部(HA)。在10 lx和20 lx的光照下,GABA在大脑的表达较0 lx和30
为了观察和检测犬肠管的组织学结构及Ghrelin的分布情况.本研究取3周岁犬各段肠管，通过石蜡切片制作、H.E和免疫组化染色，对其组织学结构及Ghrelin分布情况进行检测.H.E染色结果：犬肠管黏膜上皮为单层柱状上皮，黏膜肌层完整，肌层发达，肠绒毛、皱襞和肠腺等在各段肠管都存在差异.免疫组化结果：Ghrelin在空肠、结肠和直肠的黏膜层的表达呈强阳性，阳性细胞染色为深褐色；十二指肠和盲肠黏膜层表
In order to investigate the effect of INF-γ on the expression of IL-10 in Hypothalamus-pituitary-ovary Axis and peripheral blood of early pregnant rats.9d pregnant rats were divided into control group
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