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<正>本研究在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了奇异变形杆菌L氨基酸脱氨酶,并以此重组大肠杆菌全细胞转化L-苯丙氨酸生产α-苯丙酮酸。确定了最优反应体系为:细胞浓度6 g/L,L-苯丙氨酸浓度12 g/L,pH为7.0,35℃下转化12 h,α-苯丙酮酸产量为6.2g/L,比原来4.5 g/L提高27.4%。通过三轮易错PCR对L氨基酸脱氨酶进行定向进化,得到了底物催化能力显著提高的突变体epPCR 3,经过全细胞转化,PPA产量为8.1 g/L,比原来6.2g/L提高30.6%,经测序,有四个位点突变Asp165Gly、Phe263Val、Ser179Leu和Leu336Val。此突变体有望应用于工业化,实现低能耗、高效率、高纯度、无污染的