【摘 要】
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目的制备布鲁菌VirB5蛋白单克隆抗体,用于布鲁菌病病原诊断研究。方法用纯化的布鲁菌VirB5蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经三次筛选及克隆化,建立可以稳定
【机 构】
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石河子大学生命科学学院; 山东能源淄博矿业集团中心医院; 石河子大学医学院; 石河子大学动物科技学院;
【基金项目】
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国家重点研究发展计划(2017YFD0500304);国家自然科学基金(81560338、31572491)~~
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目的制备布鲁菌VirB5蛋白单克隆抗体,用于布鲁菌病病原诊断研究。方法用纯化的布鲁菌VirB5蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经三次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗VirB5单克隆抗体的杂交瘤细胞株;将杂交瘤细胞对Balb/c小鼠进行腹腔注射,收集腹水,用酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白免疫印迹(Western blot)分别对获得的单克隆抗体特性进行鉴定。结果获得6株单克隆抗体细胞株(2#、12#、19#、25#、31#和40#),Western Blot显示单克隆抗体细胞株19#能特异性识别VirB5纯化蛋白,并鉴定为Ig G1亚型;间接ELISA法测得腹水抗体效价为1:51200。结论成功获得布鲁菌表面蛋白VirB5的单克隆抗体,该单克隆抗体的制备为布鲁菌病病原诊断方法的建立提供了一种备选材料。
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