结核分枝杆菌Rv3425特异性蛋白片段与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用价值

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目的:结核分枝杆菌Rv3425生物信息学分析及抗原表位预测;评价Rv342519~176重组蛋白与CFP10-ESAT6融合蛋白在结核抗体检测中的应用. 方法:PCR扩增结核杆菌Rv342519~176位的基因片段,原核表达并纯化Rv342519~176重组蛋白(rRv342519~176)和CFP10-ESAT6融合蛋白(rCFP10-ESAT6).建立以重组蛋白为抗原的ELISA方法,评价两种蛋白在结核抗体检测中的联合应用价值. 结果:具有抗原表位的rRv342519~176与rCFP10ESAT6在大肠杆菌中高效表达;ELISA结果显示,rRv342519~176的敏感性为39%,特异性97.5%;rCFP10-ESAT6敏感性为37%,特异性为95%;而两种蛋白联合检测,敏感性提高到57%,特异性95%. 结论:生物信息学预测Rv3425的优势抗原表位,表达并纯化的rRv342519~176和rCFP10-ESAT6在结核抗体检测中具有一定抗原互补性,在保持特异性的基础上可显著提高检测敏感性.
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