大脑皮层梗死后继发丘脑、中脑、脊髓和臂丛神经损害的实验研究

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目的:观察实验性大脑皮层梗死后同侧丘脑、中脑黑质及对侧脊髓前角、臂丛神经是否发生继发性损害,探讨这种继发性损害是否与细胞凋亡相关;方法:将易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP),随机分成假手术组和皮层梗死组,每组32只。皮层梗死组用电凝法建立右侧大脑中动脉皮层支闭塞(MCAO)模型,假手术组仅暴露而不凝闭大脑中动脉。分别取各组8只大鼠于术后第1周、2周、3周和4周,取鼠脑、脊髓行免疫组化检查,检测大鼠不同时点同侧丘脑腹后核、中脑黑质及对侧脊髓前角的微管相关蛋白2(MAP-2)及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化;对侧臂丛神经行砂罗铬花青染色法观察髓鞘结构改变、甘氨酸银浸染色法观察轴突结构的改变及HE染色观察臂丛神经整体结构的改变;原位末端标记TUNEL法观察大鼠不同时点同侧丘脑腹后核、中脑黑质及对侧脊髓前角的的细胞凋亡情况;结果:1.皮层梗死组大鼠 MAP-2免疫组化结果显示,皮层梗死组术后第1周,同侧丘脑腹后核、中脑黑质MAP-2阳性信号开始降低,随后的各个时间点表达也均低于假手术组(P<0.05);皮层梗死组术后第2周始,对侧脊髓前角MAP-2阳性信号开始降低,第3周、4周的表达均低于假手术组(P<0.05)。2.皮层梗死组大鼠GFAP免疫组化结果显示,皮层梗死组术后第1周,同侧丘脑腹后核、中脑黑质、对侧脊髓前角GFAP阳性细胞数目和阳性信号开始升高,随后的各个时间点表达均高于同期假手术组(P<0.05)。3.皮层梗死组大鼠对侧臂丛神经HE染色显示,皮层梗死组术后第1、2、3、4周对侧臂丛整体结构与假手术组相比,未见改变; 用砂罗铬花青染色法显示髓鞘结构,发现皮层梗死组术后第1、2、3、4周对侧臂丛髓鞘结构与假手术组相比,未见明显改变;用甘氨酸银浸染色法显示轴突结构,发现皮层梗死组术后第1、2、3、4周对侧臂丛轴突结构与假手术组相比,未见明显改变。4.原位末端标记(TUNEL)染色凋亡细胞显示,皮层梗死组术后第1周,右侧丘脑腹后核、中脑黑质TUNEL阳性细胞数增加,术后第2周达到高峰,之后增加幅度逐渐减弱,但各个时间点表达均高于同期假手术组(P<0.05);皮层梗死组左侧脊髓前角各个时间点未见TUNEL阳性细胞表达,与同期假手术组相比,无明显差异。结论:1.高血压大鼠大脑皮层运动感觉区梗死后,与大脑皮层存在大量纤维联系的同侧丘脑腹后核、中脑黑质及对侧脊髓前角神经元细胞存在继发性损害,并且星形胶质细胞增生明显;观察期内所用方法未观察到对侧臂丛神经的结构损害。2.大脑皮层梗死后,细胞凋亡参与了远离梗塞灶的丘脑和中脑黑质继发性损害的发生过程。
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