【摘 要】
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目的：以K562及耐阿霉素的K562细胞(K562/A02)及耐伊马替尼的K562细胞(K562/G01)为研究对象,观察NPM基因沉默对它们的耐药表型及生物学特性的影响. 方法：采用RNA干扰技术,构
【机 构】
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福建医科大学附属协和医院血液科,福州350001
【出 处】
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第四届全国血液肿瘤学术大会暨第七届全国淋巴肿瘤诊治进展研讨会
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目的：以K562及耐阿霉素的K562细胞(K562/A02)及耐伊马替尼的K562细胞(K562/G01)为研究对象,观察NPM基因沉默对它们的耐药表型及生物学特性的影响.
方法：采用RNA干扰技术,构建NPM-RNAi载体,特异性沉默NPM基因的表达,并建立稳定转染的K562/shRNA细胞、K562/A02/shRNA细胞以及K562/G01/shRNA细胞.采用生长曲线绘制、克隆形成实验、流式细胞检测、实时定量RT-PCR,蛋白印迹法等技术观察NPM基因沉默后对K562/shRNA细胞、K562/A02/shRNA细胞以及K562/GO1/shRNA细胞耐药表型及生物学特性的影响。
结果：NPM基因沉默后可以使细胞的增殖受抑制，细胞凋亡率与未转染对照组比较显著增高（P＜O.05)，并以早期凋亡为主，K562/A02细胞对阿霉素的RI值由转染前的22.91mM下降至转染后的18.03mM, K562/GO1细胞对伊马替尼的耐药性由转染前的6.84mM下降至转染后的4.6mM。并NPM基因沉默后还可以使细胞的Bcr/Abl mRNA表达水平下调。
结论:特异性地沉默NPM基因，可以抑制K562细胞及其耐药细胞株(K562/A02,K562/GO1)的增殖，诱导细胞凋亡，促进细胞分化，部分下调细胞的耐药性，说明NPM高表达可能参与了白血病的耐药过程。
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