PDGF/PDGFR/PLCg1信号通路调控骨软骨前体细胞功能活性变化

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sz_davild
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  目的:通过对晚期骨关节炎(OA)患者关节软骨中CD146+骨软骨前体细胞(osteochondroprogenitors,CD146+OCPs)进行分离、鉴定及功能活性变化检测,探索其分布、数量及增殖迁移分化等功能改变与OA退变程度之间的相互关系.进一步运用PLCg1条件性基因敲除小鼠模型检测血小板衍生生长因子(PDGF)对OCPs各项功能活性调控的分子机制.方法:收集2013.10-2014.07期间收入我科行全膝关节置换术的晚期OA单髁病变患者术中废弃的骨软骨组织,一方面运用免疫组化技术检测CD146+OCPs在OA骨软骨组织中的分布;另一方面,将病损严重的股骨内侧髁与病损较轻的外侧髁分别进行剪切、酶解消化,体外分离培养CD146+OCPs,然后运用克隆形成试验、多向诱导分化试验及流式细胞技术检测等对其前体细胞特性进行检测.比较其在内外侧髁中的分布及含量来探究CD146+OCPs功能活性变化与OA病理改变之间的作用关系.运用Cre/loxp重组酶系统分别构建Nestin-Cre/R26-PLCg1-loxp-YFP和Osterix-Cre/R26-PLCg1-loxp-YFP杂交小鼠模型,通过比较PLCg1条件性敲除和野生小鼠中Nestin-Cre间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,Nes-Cre MSCs)及Osterix-Cre骨软骨前体细胞(osteoprogenitors,Osx-Cre OCPs)克隆形成能力及多向分化能力的差异,检测PLCg1对小鼠Nes-Cre MSCs及Osx-Cre OCPs功能活性的影响.
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骨性关节炎(OA)是软骨和软骨下骨的共同退变过程。如果将关节作为一个器官,软骨下骨和软骨是该器官的基本结构和功能单位,它们的微结构在维持整个器官形态和发挥器官功能中起着重要作用。微结构是软骨下骨和软骨共同承担关节的应力,发挥关节功能的基础;正是通过骨软骨间的微结构,软骨和软骨下骨才能在生物学上相互交流、相互影响和作用,共同促进骨关节炎的病变。
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