苯并(a)芘对神经元的细胞毒性及CYP1A1的诱导表达

来源 :中国毒理学会第五次全国学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cs8613416
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  目的 研究苯并(a)芘对神经元细胞毒性、细胞凋亡与CYP1A1诱导表达的关系.方法 选用新生1~3d的SD大鼠分离大脑皮质进行神经元培养,在细胞培养第5天左右,选取生长良好的同批次神经细胞,以苯并(a)芘分别对神经元染毒,使苯并(a)芘终浓度分别为0μM、10μM、20 μM,40μM.继续培养48h,应用cck8试剂盒检测神经元活力、Annexin Ⅴ和PI双染法进行细胞凋亡的检测,应用RTPCR法对神经元CYP1A1mRNA表达,免疫组化SABC法和Western-blot检测了神经元CYP1A1蛋白的表达.结果 随着B(a)P浓度的增加,神经元细胞活力降低、早期凋亡率逐渐增高,细胞活力中高剂量组与对照组比较差异均有统计学意义,早期凋亡率仅高剂量组与对照组比较差异有统计学意义,趋势检验表明细胞活力降低、凋亡率增高具有剂量依赖性.而且随B[a]P剂量的增高,CYP1A1mRNA及蛋白表达增多,有剂量-反应关系,CYP1A1基因和蛋白表达与神经元细胞凋亡率的相关分析表明:神经细胞凋亡率与CYP1A1mRNA表达呈正相关(r=0.831,P<0.01);与CYP1A1蛋白表达呈正相关(r=0.780,P<0.01).结论 B(a)P可致神经细胞凋亡,神经元CYP1A1诱导表达是神经元损伤的关键因素.
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