【摘 要】
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目的：探究卵巢癌细胞中Dicer低表达所引起的蛋白组学改变，并寻找Dicer下游关键靶蛋白，以明确Dicer调控卵巢癌细胞恶性生物学行为的分子机制。方法：利用细胞EdU增殖实验，体外克隆形成实验，划痕实验和迁移实验验证Dicer低表达后卵巢癌细胞功能学改变；利用高通量双向电泳技术和蛋白质谱鉴定分析Dicer低表达后卵巢癌细胞蛋白谱的改变；DAVID和String 10软件分析筛选Dicer下游与卵
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院
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目的：探究卵巢癌细胞中Dicer低表达所引起的蛋白组学改变，并寻找Dicer下游关键靶蛋白，以明确Dicer调控卵巢癌细胞恶性生物学行为的分子机制。方法：利用细胞EdU增殖实验，体外克隆形成实验，划痕实验和迁移实验验证Dicer低表达后卵巢癌细胞功能学改变；利用高通量双向电泳技术和蛋白质谱鉴定分析Dicer低表达后卵巢癌细胞蛋白谱的改变；DAVID和String 10软件分析筛选Dicer下游与卵巢癌恶性生物学行为密切相关的靶蛋白；利用siRNA技术干扰靶基因表达并在裸鼠动物实验中验证Dicer及其下游靶蛋白PDIA3对卵巢癌细胞功能的影响。结果：细胞功能学实验结果显示Dicer低表达能够促进卵巢癌细胞增殖和迁移能力；本研究团队通过生物信息学分析发现Dicer氏表达卵巢癌细胞中蛋白点数目明显增多，并且从30个蛋白质谱鉴定点中获得PDIA3可能为Dicer下游的功能性靶蛋白，同时PDIA3的表达在Dicer低表达卵巢癌细胞中明显升高。体内和体外实验均证实抑制PDIA3表达后能显著逆转Dicer低表达所引起的恶性生物学行为。靶向结合PDIA3启动子区域的microRNA-148a和microRNA-494在Dicer低表达卵巢癌细胞中均呈低表达。结论：Dicer低表达通过影响microRNAs的表达，介导PDIA3表达上调从而促进了上皮性卵巢癌细胞恶性增殖和迁移行为。
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