论文部分内容阅读
目的：Foxo转录因子在细胞增殖、分化及凋亡中发挥着重要作用，且Foxo参与了多种非神经细胞的分化调控，但其对神经细胞分化的作用仍未有报道。Foxo3a作为Foxo转录因子家族的一员，在哺乳动物的大脑高表达。本项目拟探讨Foxo3a对NGF诱导的PC12细胞神经分化的影响及其机制。
方法：使用NucleofectorTM Ⅱ核转染仪将表达6FP-N1-Foxo3a融合蛋白的质粒和空白质粒(GFP-N1)转染入PC12细胞24小时后，对转染的细胞进行NGF诱导，在倒置荧光显微镜下观察PC12细胞神经纤维生长情况，计算分化率，与对照组相比，分析转染后Foxo3a的表达对细胞分化的影响；western blot鉴定转染后PC12细胞神经分化信号通路即TrkA/ERK的变化。
结果：转染GFP-N1-Foxo3a的PC12细胞的分化率低于对照组，其中第4(p＜0.05)、5(p＜0.01)、6(p＜0.01)、7(p＜0.01)天的分化率差异具有统计学意义；与对照组相比，转染GFP-N1-Foxo3a的PC12细胞在NGF作用下的TrkA、ERK磷酸化水平均有明显降低且NGF的作用时程缩短。
结论：Foxo3a可以抑制NGF诱导的PC12细胞神经分化，且可能是通过TrkA/ERK信号通路抑制PC12细胞的神经分化。