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研究背景:巨噬细胞表面表达多种受体,分泌多种细胞因子,参与免疫调节。TRIM59是TRIM蛋白家族的一员,因有RING结构而被归为泛素连接酶,对固有免疫应答产生正向或负向调控。课题组前期工作发现,BCG激活巨噬细胞后TRIM59高表达,用抗体封闭TRIM59,巨噬细胞的直接接触杀伤作用明显降低,又有研究发现该蛋白可以结合ECSIT调节固有免疫应答。然而,BCG是怎样激活巨噬细胞从而上调表达TRIM59还不清楚,TRIM59在巨噬细胞上表达对巨噬细胞的生物学活性如增殖、凋亡、表型、吞噬功能有何影响也未见报导。研究目的:(1)探究BCG上调表达TRIM59的信号通路;(2)明确TRIM59对巨噬细胞生物学活性的调控作用。研究方法 :用BCG激活RAW264.7细胞,同时用TLR2和TLR4中和抗体进行封闭、siRNA干扰IRF5,检测TRIM59、IFR5、TNF-α的表达,并用上述处理的RAW264.7细胞上清与MCA207纤维肉瘤细胞共培养,检测后者的细胞活力;构建TRIM59不同表达水平的RAW264.7细胞系,用转录组测序技术检测了TRIM59对RAW264.7细胞mRNA水平的整体调控。此外,我们检测与吞噬相关分子的表达情况、细胞因子分泌水平以及吞噬荧光微球的能力,并检测了TRIM59对巨噬细胞周期、细胞活力及凋亡的影响。结果 :(1)BCG活化的RAW264.7细胞膜上高表达TRIM59,并发现通过TLR2/4/IRF5信号通路实现;(2)转录组测序提示TRIM59影响多个基因的转录,参与受体表达、吞噬、细胞因子分泌等细胞进程;(3)TRIM59促进与非调理性吞噬相关的CD172a、CD206及与IgG介导吞噬相关的CD16、CD32、CD64的表达,抑制与抗原提呈相关的MHCII、CD86及与补体介导吞噬相关的CD11b的表达;(4)TRIM59促进抑炎因子的分泌;(5)TRIM59能够促进巨噬细胞非调理性吞噬及IgG介导的调理性吞噬,抑制补体介导的调理性吞噬;(6)TRIM59促进细胞增殖,对凋亡细胞无明显影响。结论 :(1)BCG通过TLR2/4/IRF5信号上调RAW264.7细胞膜上的TRIM59;(2)TRIM59促进巨噬细胞分泌抑炎因子、促进巨噬细胞吞噬作用、促进巨噬细胞自身的增殖。