【摘 要】
：
目的 建立体外人脐静脉内皮细胞分离培养方法,为研究血管内皮生理及病理变化提供细胞模型及实验基础.方法 收集足月妊娠健康产妇行剖官产术后的新生儿的脐带(长度于20 cm)若干根,迅速转移至细胞室超净台中.无菌生理盐水冲洗脐带表面,轻轻挤压,挤出其内淤血,剪去两端有钳痕部分,头皮针插入脐静脉中,止血钳夹紧,抽取生理盐水冲洗脐静脉,至冲出的液体澄清,止血钳夹紧另一端,0.125％胰酶+0.01％ EDT
【机 构】
：
250021济南,山东省立医院内分泌科
【出 处】
：
中华医学会第九次全国内分泌学学术会议
论文部分内容阅读
目的 建立体外人脐静脉内皮细胞分离培养方法,为研究血管内皮生理及病理变化提供细胞模型及实验基础.方法 收集足月妊娠健康产妇行剖官产术后的新生儿的脐带(长度于20 cm)若干根,迅速转移至细胞室超净台中.无菌生理盐水冲洗脐带表面,轻轻挤压,挤出其内淤血,剪去两端有钳痕部分,头皮针插入脐静脉中,止血钳夹紧,抽取生理盐水冲洗脐静脉,至冲出的液体澄清,止血钳夹紧另一端,0.125％胰酶+0.01％ EDTA溶液注入脐静脉中使之充盈,轻轻晃动使液体充分作用,10 min或15 min后抽取脐静脉内的液体至50 ml离心管中,3ml M199完全培养基(含10％胎牛血清,100 U/ml青霉素、链霉素,2 mmol/L的L-谷氨酰胺)终止消化,或将无头皮针的一端剪断,使其内液体流入离心管中,无菌生理盐水注入脐静脉,随即抽出一并收入离心管,1 000转/min离心10 min,弃上清,加入M199完全培养基3ml,吹打成细胞悬液,接种于60mm细胞培养皿中,置于37℃,5％CO2的细胞培养箱中培养,24h后换液,除去漂浮的红细胞.
其他文献
目的 探讨老年2型糖尿病伴高脂血症患者对尿白蛋白的影响及相关因素分析.方法 检测了单纯高脂血症组(HL)1 464例、单纯2型糖尿病组(T2DM) 469例、2型糖尿病伴高脂血症组(T2DML) 703例和正常对照组(C)1 301例空腹血糖(FBG)和餐后2h血糖(2 h BC)、血脂和尿蛋白肌酐比值测定(ACR).结果 T2DML组尿蛋白肌酐比值明显高于HL组及T2DM组，这三组ACR均明显高
目的 分析2型糖尿病患者葡萄糖耐量试验3h动态血糖谱的特点，探讨动态血糖监测系统在DM诊断中的价值。方法 对2008年4月至2010年2月在我院诊治的23例2型糖尿病患者和4例IGT患者进行连续3d的动态血糖监测，同时进行葡萄糖耐量试验(OGTT或馒头餐试验)。分为CGMS(Continuous glucose monitoring system)组；DGMS(Dynamic glucose mo
目的 观察男性2型糖尿病患者合并不同数目代谢综合征(metabolic syndrome,MS)组分,对腰椎24骨密度(L2-4bone mineral density,L2-4 BMD)的影响,以期为预防和治疗糖尿病性骨质疏松提供理论依据。方法 将228例男性2型糖尿病患者根据合并MS组分数目不同,分为不伴有其它MS组分的单纯2型糖尿病组(GO组),合并1个组分(G1组),合并2个组分(G2组)
目的 探讨2型糖尿病患者不同尿白蛋白排泄率血清炎症因子水平与胰岛素抵抗的关系。方法 113例2型糖尿病患者根据尿蛋白排泄率(UAER)(尿白蛋白与尿肌酐的比值,urinary albumin to creatinine ratio,ACR)分为正常白蛋白尿组(D1组43例)、微量白蛋白尿组(D2组39例)、临床白蛋白尿组(D3组31例),分别测定体重指数(BMI)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(
目的 研究福建地区汉族代谢综合征(MS)伴有2型糖尿病患者颈动脉内膜中层厚度(CIMT)与血浆脂联素水平及脂联素基因启动子区-11377C→G位点单核苷酸多态性(SNP)的关系。方法 随机选择代谢综合征伴有糖尿病患者共218例,按C-IMT分为年龄、性别比例相近的颈动脉内膜中层厚度正常(MS1) 115例,颈动脉内膜中层厚度增厚组(MS2)103例,测定空腹血浆脂联素浓度及空腹血糖(FPG)、空腹
目的 研究2型糖尿病(T2DM)患者血浆脂联素(APN)水平及脂联素基因启动子区-11377位点单核苷酸多态性(SNP)与糖尿病视网膜病变(DR)之间的关系。方法 运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术，对200例2型糖尿病患者[无DR (NDR)组82例、非增殖型DR(NPDR)组72例、增殖型DR (PDR)组46例]，检测APN基因启动子SNP-11377C→G多态性
目的 观察高糖对MC3T3-E1成骨细胞凋亡及凋亡相关调控基因Capase3、bax、bcl-2表达的影响。方法 构建成功的p38MAPK-shRNA慢病毒载体转染体外培养的MC3T3-E1成骨细胞,并分为：正常对照组,高糖组,p38MAPK-shRNA慢病毒转染组,信号转导阻断剂组,无关shRNA转染组。培养7天后收集细胞,RT-PCR检测细胞p38MAPK mRNA表达,TUNEL、流式细胞术
目的 探讨Exendin-4对胰岛β细胞氧化损伤下发生内质网应激的保护作用,及其在其诱导下相关凋亡信号通路的保护作用.方法 选用小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞为研究对象,用不同浓度(0～400 μmol/L)、不同时间(0.5～8 h)t-BHP诱导刺激,模拟体外胰岛β细胞氧化损伤后细胞凋亡模型,用MTT法、CCK-8法检测细胞增殖活力,Hoechst-PI染色法、Annexin-V-PI流式细胞技
目的 探讨链脲佐菌素诱(STZ)导的糖尿病大鼠脾脏免疫损伤及吡格列酮的干预作用.方法 48只8周龄健康雄性SD大鼠,随机分为糖尿病吡格列酮干预组(Pio组)、糖尿病甘精胰岛素干预组(INS组)、单纯糖尿病组、正常对照组.采用尾静脉注射STZ(45 mg/kg)方法建立糖尿病模型后,Pio组给予吡格列酮(20 mg· kg-1·d-1)灌胃和生理盐水(0.1 ml/d)皮下注射,INS组给予甘精胰岛
目的 测定PCOS女性患者的血清apelin水平，并探讨其与空腹胰岛素水平、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、体重指数(BMI)等的相关性。方法 69例PCOS患者和31例正常对照组按体重指数(BMI)≥25 kg/m2或＜25 kg/m2又各自分为超重/肥胖与正常体重亚组，采用放免法检测空腹血清apelin水平，同时检测空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、性激素水平，计算BMI和