【摘 要】
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目的 以由中国人外周血淋巴细胞克隆表达的人胸腺素alpha原为抗原,制备单克隆抗体,并对其进行分离纯化与鉴定。方法 重组人胸腺素alpha原由本实验室克隆表达,纯度为96％(HP
【机 构】
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厦门大学环境与生态学院,环境毒理实验室
【出 处】
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2013年肿瘤多学科综合诊治新进展学术研讨会
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目的 以由中国人外周血淋巴细胞克隆表达的人胸腺素alpha原为抗原,制备单克隆抗体,并对其进行分离纯化与鉴定。方法 重组人胸腺素alpha原由本实验室克隆表达,纯度为96％(HPLC),以此为抗原制备完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂,免疫Balb/C小鼠,ELISA检测抗体达到合适效价后,分离小鼠脾脏淋巴细胞,应用杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,经筛选获得3株阳性克隆,分离纯化获得纯化抗体。采用ELISA试验,斑点杂交,免疫组化和Wester-blot方法对所得抗体进行鉴定。结果 实验所得3株细胞株均能够与标准品、肿瘤细胞及胸腺组织产生阳性反应,表现出明显的特异性。结论 实验证明,所获抗体能够用于细胞中胸腺素alpha原的定位检测,样品中胸腺素alpha原的定量分析,同时为进一步开展胸腺素alpha原的生物学功能与作用机理的研究奠定了基础。
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