【摘 要】
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目的 研究CD105表达的变化在肝癌血管生成中的作用以及对肝癌发生发展的影响.方法 首先观察CD31和CD105在肝癌组织中的表达,取临床90例肝癌组织样本制作组织芯片,用内皮
【机 构】
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南通大学附属肿瘤医院肿瘤研究所中心实验室
【出 处】
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肿瘤多学科综合诊治新进展学术研讨会
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目的 研究CD105表达的变化在肝癌血管生成中的作用以及对肝癌发生发展的影响.方法 首先观察CD31和CD105在肝癌组织中的表达,取临床90例肝癌组织样本制作组织芯片,用内皮细胞表面标志CD31和CD105进行免疫组化染色；同时在细胞水平上观察CD31和CD105在肝癌血管内皮细胞的表达,采用CD31磁珠阳性分选的方法,分离提取CD31阳性细胞,用内皮细胞专用培养基ECM(含5％FBS,1％ECGS)进行培养；取第2代培养的细胞作爬片荧光免疫染色,然后进行激光共聚焦观察分析,以HUVEC细胞为阳性对照；为了定量分析CD105在肿瘤血管中的表达,取16例肝癌病人外科手术切除新鲜癌组织标本,用0.1％Ⅰ、Ⅳ型胶原酶消化,将制成的单细胞悬液进行CD105和CD31荧光免疫染色,用流式细胞仪检测分析CD31及CD105表达含量.结果 (1)在组织芯片上,发现所有肝癌标本的癌区和癌旁血管都表达CD31,而91％标本在癌旁组织血管中表达CD105,但在癌区血管的CD105表达明显下调,其中73.3％标本的癌区无或极弱的CD105表达；(2)临床随访资料提示,绝大多数(74.4％) CD105表达阴性的病例是肝癌恶性程度高、病理分级Ⅲ度的患者；(3)为进一步证实组织水平上的结果,在细胞水平上进行了分析：用新鲜肝癌手术切除标本进行流式细胞仪定量及激光共聚焦分析,观察到CD31与CD105共染时,肝癌标本中CD105的表达程度不同与病理分级有关,在Ⅲ度肝癌标本CD31阳性细胞群里几乎没有CD105表达,结果与组织学检测一致.结论 CD105在肝癌组织血管内皮细胞中表达越低,肝癌恶性程度越高.
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