大规模MICA基因第2至4外显子双向测序及分子克隆检测技术平台的建立

来源 :中华骨髓库第四届年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aiqi527927
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目的:建立稳定的、大规模的MICA基因第2至第4外显子双向测序分型检测技术平台,并分析其单核苷酸多态性(SNP). 方法:采用自行设计MICA基因第2至5外显子扩增引物及测序引物,探索最适合PCR扩增及测序反应条件.采用商品化MICA基因单向测序分型试剂盒作平行对照.对4个含MICA*010等位基因的样本采用自行设计引物扩增并进行分子克隆和单倍体测序. 结果:采用自行建立的MICA基因双向测序分型方法确正了100人份平行对照组单向测序分型结果.应用本研究建立的方法获得了中国人群MICA基因第2至4外显子22个单核苷酸(SNP)多态性位点.两个新等位基因MICA*065、MICA*066获WHO因子命名委员会命名.首次发现了MICA等位基因第3内含子新的SNP位点,序列已提交IMGT/HLA数据库. 结论:建立的MICA基因双向测序方法,可大规模地运用于中国人群的MICA基因多态性、组织器官移植配型及疾病相关性研究领域.
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