【摘 要】
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本研究采用毛细玻璃管法对牛卵母细胞进行玻璃化冷冻保存，解冻后再进行体外受精(IVF)和早期胚胎的体外培养(IVC)。在此技术的基础上，分别对冷冻前平衡时间、解冻处理、卵丘细胞层数以及卵母细胞所处的减数分裂阶段等影响卵母细胞冷冻保存的因素进行研究，以期筛选出适合牛卵母细胞冷冻保存的方法。结果发现，处于MⅡ期卵母细胞在10％二甲基亚砜(DMSO)+10％乙二醇(EG)液(VS1)中平衡1-3min，然
【机 构】
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山东省农业科学院 畜牧兽医研究所,山东省畜禽疾病防治与繁育重点实验室,济南 250100
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会
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本研究采用毛细玻璃管法对牛卵母细胞进行玻璃化冷冻保存，解冻后再进行体外受精(IVF)和早期胚胎的体外培养(IVC)。在此技术的基础上，分别对冷冻前平衡时间、解冻处理、卵丘细胞层数以及卵母细胞所处的减数分裂阶段等影响卵母细胞冷冻保存的因素进行研究，以期筛选出适合牛卵母细胞冷冻保存的方法。结果发现，处于MⅡ期卵母细胞在10％二甲基亚砜(DMSO)+10％乙二醇(EG)液(VS1)中平衡1-3min，然后进行玻璃化冷冻保存。解冻时将卵母细胞先移入VS1液中处理15s，然后移入蔗糖稀释液中。另外发现，冷冻保存时部分卵丘细胞对卵母细胞有保护作用。而减数分裂阶段不影响解冻后卵母细胞形态正常率，但对胚胎发育率有严重影响。
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单精子细胞质内注射(Intracytoplasmic sperm injection，ICSI)，是显微受精的一种，以其高效性已广泛应用于生产、科研和医学的诸多领域。本文从关于第一极体，精子制动、精子顶体、与IVF的关系、安全性等五方面，探讨了ICSI技术的研究进展，并简要地展望了其发展前景。
[目的]本研究旨在比较小鼠早期胚胎程序化冷冻时存活率的影响。[方法]取小鼠原核(220枚)、2-4细胞(227枚)、桑椹胚(127枚)胚胎分成三组，每一时期胚胎分成两半，一半取出后立即冷冻复苏并体外培养到囊胚，另一半体外培养到囊胚后冷冻复苏，子宫冲取囊胚(78枚)冷冻复苏为对照组;各组囊胚均移植子宫。[结果]结果表明：原核、2-4细胞，桑椹胚体外培养到囊胚后冷冻复苏率为56.4％、72.2％、81
选取28头14月龄左右青年荷斯坦奶牛，随机分为高剂量组10头、低剂量组10头、对照组8头。高剂量组首次免疫重组猪抑制素亚基融合蛋白1mg/头，首次后第28和第56天分别进行加强免疫，剂量为0.5 mg/头，低剂量组免疫重组猪抑制素亚基融合蛋白与高剂量组时间相同，但每次剂量减半，对照组牛同期注射矿物油与生理盐水混合佐剂。在第二次加强免疫后11天，采用FSH四日递减法对三组牛进行超排处理，并根据发情情
为研究胚胎发育阶段与受体移植时间同步性的关系，本试验将供体奶牛配种后7-7.5d获得的不同发育阶段的常规胚胎和性别鉴定胚胎分别移植给发情后不同天数的受体，统计其妊娠率。实验结果如表所示，常规桑椹胚在发情后7d、7.5d移植妊娠率(59.18％，56.25％)较高于8d妊娠率(40％)，但各组之间无显著差异(P□0.05);早期囊胚在发情后7.5d移植妊娠率(71.43％)显著性高于发情后7d(43
尝试改进并建立一种较可靠的、适合小鼠胚胎质量参考鉴定的双重荧光染色(细胞计数)方法。与传统方法相比，本实验中抗羊脾细胞抗血清的最佳稀释度为1□5，作用时间为30 min。豚鼠补体最佳稀释度为1□5，两种分染染料H33342和PI的工作浓度均降低至5.3 μg/mL便可着色，染色时间延长至90 min，加大了染料工作液中柠檬酸钠的浓度，并在计数观察前增加压片这一步骤。染色过程中应注意避免血清物质对抗
本文研究了运输应激、重复激素处理和不同来源促卵泡素对诱导羔羊卵泡发育(简称“幼羔超排”)效果的影响，比较了幼羔超排卵母细胞与屠宰场成年羊离体卵巢卵母细胞体外受精及早期胚胎体外发育能力，并研究了在发育液中添加EDTA对幼羔卵母细胞体外受精及早期胚胎发育能力的影响，结果表明：运输应激不影响幼羔超排所获卵母细胞数量(P＞0.05)，但重复幼羔超排会显著降低所获卵母细胞数量(P＜0.05)。加拿大和宁波产
本文从鲜精与冻精、激活方法以及气相条件三个方面，开展了影响山羊卵母细胞质内单精子注射(ICSI)效果的因素研究。结果为：(1)冻精受精率显著高于鲜精(52.21％VS26.44％)(p＜0.05);(2)与离子霉素5min+6一DMAP 3h联合激活(试验一组)相比，离子霉素单独处理15min(试验二组)能相对简捷.有效地激活ICsI后的山羊卵母细胞(卵裂率82.69％VS78.40％;桑椹胚率4
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3个实验就猪精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果进行了研究。结果表明，采用猪精子提取物显微注射孤雌激活猪卵母细胞的最佳注射剂量为2-4pl;采用液氮反复冻融法和超声波破碎法提取的猪精子提取物对猪卵母细胞都有显著的孤雌激活效果，2种提取方法孤雌激活效果差异不显著。猪精子蛋白浓度在1.35mg/ml以上，注射剂量为2-4pl时均可有效激活猪卵母细胞。
本研究采用液氮反复冻融或超声波破碎法获取水牛精子提取物，然后部分精子提取物采用超滤技术对精子蛋白进行了浓缩处理;采用紫外光度吸收法测定精子提取物中的蛋白质浓度。按实验设计通过显微注射将2-4pL含不同蛋门浓度的水牛精子提取物注入体外成熟的猪卵母细胞胞质内，观察孤雌激活处理后卵母细胞原核形成、卵裂以及随后发育到桑椹胚/囊胚的情况，以综合评定水牛精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果。