【摘 要】
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目的 明确腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路是否可以抑制肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的增殖及其分子机制。方法 原代培养大鼠PASMCs,特异性沉默AMPK α1和AMPK α2,采用BrdU掺入法检测细胞增殖,Western blot检测p-/t-mTOR、Skp2和p27水平；进一步在沉默AMPK之前,预先用mTOR siRNA或Skp2 siRNA转染PASMCs,检测细胞增殖及Skp
【机 构】
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西安交通大学医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科
【出 处】
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2016中华医学会呼吸病学年会暨第十七次全国呼吸病学学术会议
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目的 明确腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路是否可以抑制肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的增殖及其分子机制。方法 原代培养大鼠PASMCs,特异性沉默AMPK α1和AMPK α2,采用BrdU掺入法检测细胞增殖,Western blot检测p-/t-mTOR、Skp2和p27水平；进一步在沉默AMPK之前,预先用mTOR siRNA或Skp2 siRNA转染PASMCs,检测细胞增殖及Skp2和p27水平。结果 特异性沉默AMPK α2可明显促进PASMCs的增殖,而特异性沉默AMPK α1对PASMCs的增殖无明显影响；特异性沉默AMPK α2可明显增加mTOR磷酸化水平,上调Skp2、下调p27蛋白水平；预先沉默mTOR可逆转沉默AMPK α2引起的Skp2水平的升高、p27水平的降低以及PASMCs的增殖；预先沉默Skp2亦可逆转沉默AMPK α2引起的p27的下调以及PASMCs的增殖。结论 AMPK可通过抑制mTOR的活性,下调UPS中E3连接酶Skp2的表达,继而上调细胞周期抑制蛋白p27的表达,抑制PASMCs增殖。激活AMPK信号通路可能成为防治肺动脉高压的潜在治疗靶点。
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