毛竹PeSCL6基因的克隆及其原核表达分析

来源 :中国林学会竹子分会成立20周年暨第五次会员代表大会、第八届中国竹业学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tambourine
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  SCL6 蛋白属GRAS 转录因子家族HAM分支,对于植物茎端分生细胞未分化状态的维持具有重要作用.采用RT-PCR和RACE 方法从毛竹(Phyllostachys edulis)中获得一个HAM 同源基因,命名为PeSCL6.该基因全长1894 bp,其中5′非编码区长60 bp,3′非编码区长211 bp,编码区为1623 bp,共编码540 个氨基酸.Blastp 分析表明:PeSCL6 基因编码的蛋白含有GRAS 家族转录因子特有的保守结构域表明其为GRAS 家族一员,且与水稻、玉米和高粱的SCL6 有较高的一致性,均在70%以上.实时定量PCR 分析显示,PeSCL6 基因在毛竹的根、茎、叶和鞘四个组织中均有表达,其中鞘中表达丰度最高,茎中表达丰度最低.构建了含有编码PeSCL6 成熟蛋白序列的原核表达载体pET30a-PeSCL6,转化大肠杆菌并用IPTG 诱导表达,蛋白经纯化后进行SDS-PAGE,获得了约为57 kD 的目的蛋白.
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