目的:通过对大鼠进行递增负荷跑台有氧运动训练,并取得大鼠骨髓间充质干细胞培养增殖,探讨有氧运动对大鼠骨髓间充质干细胞氧化应激水平的影响。方法:SPF级SD大鼠16只,4周龄,个体差异不大,随机分为安静对照组和有氧运动组。对运动组进行跑台运动8周,每周5天,每天1次,每次60分钟。大鼠8周运动训练后24小时取材,取材前大鼠禁食12小时,按0.005ml/g注射20%乌拉坦麻醉大鼠,待大鼠麻醉后浸泡在75%酒精中5min消毒,使大鼠头部暴露在空气中,保证皮毛浸透。将大鼠固定,放在超净工作台上。打开大鼠腹腔,腹主动脉取血,室温15分钟后分离血清。迅速剥离大鼠后肢肌肉,取得股骨、胫骨并浸泡在含80U/m1青霉素和0.08mg/ml链霉素的PBS溶液中,用眼科剪和镊子尽量去除长骨上的结缔组织,骨科剪剪断长骨的两端,用注射器吸取含10%FBS,80U/m1青霉素和0.08mg/m1的DMEM低糖培养基冲取双下肢骨髓,吹散细胞后,将骨髓冲洗液移入离心管离心5分钟,弃上清液,12ml的完全培养基悬起细胞,并种于两个25平方厘米的培养瓶中,编号P0,置于37℃、5%CO2培养箱培养。隔天全量更换培养基。从原代MSCs培养开始,细胞长满越90%开始传代。用0.25%的胰蛋白酶-EDTA消化90s,以1:5的比例进行传代,记为MSCs的第1代。第2代后的各代,消化细胞后用细胞计数器测量细胞浓度,将细胞浓度调至1×10~4个/m1,每个60mm培养皿接种5ml,每样本的细胞接种两个培养皿,约6天可长满90%。用南京建成MDA试剂盒测试大鼠第5代、第8代、第10代、第12代骨髓间充质干细胞上清液中的MDA含量;使用日本同仁化学研究所SOD试剂盒测试第5代、第8代、第10代细胞上清液中SOD活性。结果采用平均数±标准差表示,所有数据采用SPSS19.0统计软件包处理,对进行方差分析和T检验,检验结果以P<0.05为显著性差异,P<0.01为非常显著性差异。结果:有氧运动组MSCs上清液中MDA含量总体低于安静对照组,有氧运动组和对照组的第10代、第12代MSCs上清液中MDA含量有显著性差异(P<0.05)。无论是有氧运动组还是安静对照组上清液丙二醛水平随传代次数增加而逐渐升高,对照组第8代MSCs上清液丙二醛水平高于第5代,有氧运动组第12代MSCs上清液丙二醛水平高于第10代,且差异有显著性意义(P<0.05)。有氧运动组和对照组MSCs上清液SOD活性的水平并没有显著性差异,有氧运动组上清液SOD活性水平随传代次数增加而逐渐升高。结论:MSCs的氧化应激与其衰老密切相关,有氧运动组与安静对照组相比上清液MDA含量相对较低,表明有氧运动可以降低氧化应激水平,延缓细胞衰老。有氧运动组与安静对照组相比上清液中SOD活性没有显著性差异,因此有氧运动是否会引起MSCs细胞内SOD活性变化而缓解MSCs衰老进程,有待于进一步研究探讨。