【摘 要】
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目的 原核表达及纯化梅毒螺旋体(Treponema palludim,Tp)热休克蛋白10(Heat shock protein 10,Hsp10),并研究其在临床分期与疗效监测中的应用。方法 设计特异性引物,以Tp基因组为模板,PCR扩增Hsp 10基因。回收PCR产物并用EcoRI和HindⅢ双酶切,酶切片段与同样酶切的质粒pET28a相连,构建表达重组质粒pET28a-Hsp 10,转化大肠
【机 构】
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中南大学湘雅二医院检验科,湖南长沙410011;湖南中医药高等专科学校附属第一医院检验科(湖南省直中医医院),湖南株洲412000
【出 处】
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2017年第二届全国特殊病原体学术会议
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目的 原核表达及纯化梅毒螺旋体(Treponema palludim,Tp)热休克蛋白10(Heat shock protein 10,Hsp10),并研究其在临床分期与疗效监测中的应用。方法 设计特异性引物,以Tp基因组为模板,PCR扩增Hsp 10基因。回收PCR产物并用EcoRI和HindⅢ双酶切,酶切片段与同样酶切的质粒pET28a相连,构建表达重组质粒pET28a-Hsp 10,转化大肠埃希菌BL21 (DE3),采用IPTG诱导重组Hsp10蛋白表达,用镍离子柱纯化目的蛋白。
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