【摘 要】
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目的 探讨血管紧张素-(1-7)(Ang-(1-7))在高糖诱导的小鼠胰岛素分泌细胞株NIT-1细胞凋亡中的作用及可能机制.方法 将对数生长期的NIT-1细胞按以下5组处理：对照组,10-5MAng-(1-7)组,高糖(HG,35mM)组,HG+Ang-(1-7)组,HG+Ang-(1-7)+Mas受体阻断剂(A-779,10-5M)组.各组处理72h,Annexin-V/PI流式细胞式及TUNE
【机 构】
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中山大学孙逸仙纪念医院内分泌科,510120
【出 处】
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2013年广东省医学会内分泌学/糖尿病学学术年会
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目的 探讨血管紧张素-(1-7)(Ang-(1-7))在高糖诱导的小鼠胰岛素分泌细胞株NIT-1细胞凋亡中的作用及可能机制.方法 将对数生长期的NIT-1细胞按以下5组处理：对照组,10-5MAng-(1-7)组,高糖(HG,35mM)组,HG+Ang-(1-7)组,HG+Ang-(1-7)+Mas受体阻断剂(A-779,10-5M)组.各组处理72h,Annexin-V/PI流式细胞式及TUNEL检测细胞凋亡率,Western blot激活型caspase-3表达；DCFH-HA荧光染色法检测活性氧簇(ROS),硫代巴比妥酸法(TBA)测定丙二醛(MDA)；Western Blot检测P-JNK、P-p38MAPK.结果 流式细胞式示,HG组细胞凋亡率显著高于对照组((27.71±5.11)％vs(9.71±2.49)％,p＜0.05),Ang-(1-7)组与对照组凋亡无显著差异((10.24±3.18)％vs(9.71±2.49)％,p＞0.05)；HG+ Ang-(1-7)组细胞凋亡率明显低于HG组((27.71±5.11)％vs(14.31±1.26)％),仍高于对照组(均为p＜0.05)；HG+Ang-(1-7)+A-779组细胞凋亡率高于HG+Ang-(1-7)组((14.31±1.26)％vs(25.17±5.79)％,p＜0.05)),且与HG组无显著差异.TUNEL结果与流式细胞学结果一致.同样,HG组激活型caspase-3表达高于对照组,加入Ang-(1-7)预处理后,表达水平明显下降；而HG+Ang-(1-7)+A-779组激活型caspase-3表达显著高于HG+Ang-(1-7)组,且与HG组无显著差异.同样,HG组ROS、MDA及P-JNK、P-p38MAPK表达明显高于对照组(均为p＜0.05),Ang-(1-7)组与对照组各指标差异均无统计学意义；HG+ Ang-(1-7)组ROS、MDA及P-JNK、P-p38MAPK均低于HG组(均为p＜0.05),其中ROS、MDA及P-p38MAPK表达与对照组无显著差异(p＞0.05),P-JNK仍高于对照组(＜0.05)；HG+ Ang-(1-7)+A-779组氧化应激指标、P-JNK及P-p38MAPK表达水平显著高于HG+ Ang-(1-7)组(均为＜0.05),且与HG组差异无统计学意义.结论 Ang-(1-7)通过Mas受体部分逆转高糖诱导的β细胞凋亡,其减少凋亡的机制可能与抑制氧化应激及JNK、p38MAPK活化有关.
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