【摘 要】
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目的:克隆茅苍术倍半萜类成分生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因全长并分析其与倍半萜关系.方法:以茅苍术总RNA为模板,运用同源克隆法和RACE技术克隆茅苍术FPPS基因的cDNA全长,并进行生物信息学分析;用QRT-PCR和GC-MS分析不同生长阶段FPPS在茅苍术根茎中的表达及倍半萜类成分含量变化,并分析二者的相关性.结果:获得茅苍术FPPS基因全长cDNA为1320bp (A1FP
【机 构】
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南京中医药大学药学院,江苏南京,210023
【出 处】
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2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会
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目的:克隆茅苍术倍半萜类成分生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因全长并分析其与倍半萜关系.
方法:以茅苍术总RNA为模板,运用同源克隆法和RACE技术克隆茅苍术FPPS基因的cDNA全长,并进行生物信息学分析;用QRT-PCR和GC-MS分析不同生长阶段FPPS在茅苍术根茎中的表达及倍半萜类成分含量变化,并分析二者的相关性.
结果:获得茅苍术FPPS基因全长cDNA为1320bp (A1FPPS,GenBank accession no.KX443242),含一个长1029 bp的开放阅读框,编码342个氨基酸,包含五个保守功能域,其中2个富含天冬氨酸(DXXDD).QRT-PCR及GC-MS结果显示不同时期茅苍术A1FPPS表达量与倍半萜类成分含量呈显著正相关.
结论:首次克隆获得茅苍术A1FPPS基因的全长cDNA,初步证明A1FPPS是茅苍术倍半萜类成分生物合成途径中的重要调控位点,为茅苍术倍半萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据.
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