【摘 要】
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鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是引起鸡新城疫的病原体.为研究鸡基因Ⅶ新城疫病毒融合蛋白F,本研究通过PCR方法扩增出鸡新城疫Ⅶ的F基因,并采用生物信息学软件
【机 构】
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北京市农林科学院畜牧兽医研究,北京100097
【出 处】
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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会
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鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是引起鸡新城疫的病原体.为研究鸡基因Ⅶ新城疫病毒融合蛋白F,本研究通过PCR方法扩增出鸡新城疫Ⅶ的F基因,并采用生物信息学软件对其进行分析,将分析后的F基因的两种基因片段分别连接到pET32-a(+)表达载体上,经转化到大肠杆菌DL21中诱导表达,并对蛋白的表达、可溶性进行鉴定、同时采对纯化后的F蛋白兔疫BALB/C小鼠制备抗血清,采用兔疫印迹方法鉴定抗血清与F蛋白及病毒的反应原性.研究结果为去除了信号肽的F基因片段分别为762bp及1347bp,将其进行表达后蛋白大小分别约为48kDa及68kDa,均为包涵体表达,该蛋白免疫小鼠制备的抗血清可以与F蛋白及NDV病毒反应.结果表明,本研究成功表达了NDVⅦ的F基因并制备了抗血清,研究结果将为新城疫病毒F蛋白的应用及基础研究提供理论参考.
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