牛血清白蛋白包裹的银纳米簇的合成及其作为一种新型的荧光探针用于生物硫醇的测定

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本文用牛血清白蛋白作稳定剂,常温下在Na OH存在时用Na BH4作还原剂,简便地合成了水溶性发红色荧光的银纳米簇(BSA-Ag NCs)[1],并用紫外可见吸收和荧光分光光度计进行了光谱表征(图1),该BSA-Ag NCs在460 nm处有一宽的小肩,而在400-500 nm没有观察到SPR特征峰,表明形成的是较小的纳米簇[2],当激发波长在465 nm时,在598 nm有最大发射;用透射电镜、动态光散射进行了粒径表征,表明该BSA-Ag NCs为球型,分散均匀平均粒径在2 nm.生物硫醇,如半胱氨酸(Cys)、高半胱氨酸(Hcy)和谷胱甘肽(GSH)中的巯基和银原子之间具有强的亲和力,当生物硫醇存在时BSA-Ag NCs的荧光强度可以被显著地猝灭.图2显示,测定条件均为p H=9.0,0.2 M的磷酸缓冲,其他氨基酸的浓度是生物硫醇的10倍,该BSA-Ag NCs对生物硫醇(Cys,Hcy和GSH)具有良好的选择性.据此我们建立了一种简便、迅速、灵敏、高选择性的荧光方法用于生物硫醇的测定,这里以半胱氨酸Cys为例(图3,插图为(F0-F)对Cys浓度的线性拟合曲线),结果表明,Cys,Hcy和GSH检测的线性范围分别为2.0×10-6-9.0×10-5 M(R2=0.994),2.0×10-6-1.2×10-5 M(R2=0.996)和1.0×10-5-8.0×10-5 M(R2=0.980);检出限分别为Cys:8.1×10-7 M,Hcy:1.0×10-6 M,GSH:1.1×10-6 M.且该方法可以成功地用于人血浆样品中生物硫醇的检测,得到了较好的回收率94.83%-105.24%.该方法进一步拓展了蛋白质包裹的银纳米簇在化学及生物传感方面的应用.
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