【摘 要】
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特应性皮炎确切的发病机制尚未完全明了,现有研究证实树突状细胞表面IgE高亲和力受体(FcεR I)异常表达与特应性皮炎发病密切相关,而FcεRIγ亚基表达在树突状细胞FcεRI表达中起关键作用.研究发现FcεRIγ亚基基因转录启动子中存在两处Alu重复序列,而Alu序列则是DNA甲基化的高发区,那么DNA甲基化是否参与FcεRIγ亚基基因转录表达的调控,并参与特应性皮炎的发病？由此设计了以下实验.
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特应性皮炎确切的发病机制尚未完全明了,现有研究证实树突状细胞表面IgE高亲和力受体(FcεR I)异常表达与特应性皮炎发病密切相关,而FcεRIγ亚基表达在树突状细胞FcεRI表达中起关键作用.研究发现FcεRIγ亚基基因转录启动子中存在两处Alu重复序列,而Alu序列则是DNA甲基化的高发区,那么DNA甲基化是否参与FcεRIγ亚基基因转录表达的调控,并参与特应性皮炎的发病？由此设计了以下实验.目的：研究树突状细胞的前提细胞即单核细胞通过DNA甲基化抑制剂处理前后FcεRIγ亚基表达,以及特应性皮炎患者和正常人树突状细胞FcεRIγ亚基基因DNA甲基化状态的异常,从而探讨AD患者中DNA甲基化对FcεRIγ亚基基因转录表达的调控作用.方法：流式细胞检测FcεRI蛋白在单核细胞表面的表达水平；实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测FcεRIγ亚基的mRNA表达水平；western-blot检测FcεRIγ亚基的蛋白表达水平；亚硫酸氢钠测序检测FcεRIγ亚基启动子DNA甲基化调控序列的甲基化状态.结果：5-azaC处理组与未处理组相比,单核细胞FcεRIγ亚基基因调控序列DNA甲基化水平明显降低(P＜0.01)； FcεRIγ亚基蛋白水平明显升高(P＜0.01)；细胞表面FcεRI表达率及强度明显升高(P＜0.01).同时,AD组与正常对照组相比,单核细胞FcεRIγ亚基基因调控序列DNA甲基化水平明显降低(P＜0.01)；FcεRIγ亚基mRNA表达水平明显升高(P＜0.01)； FcεRIγ亚基蛋白水平明显升高(P＜0.01)；细胞表面FcεRI表达水平明显升高(P＜0.05)；且AD患者FcεRIγ亚基启动子DNA甲基化水平与FcεRIγ亚基蛋白表达呈负相关性(R=-0.711,P＜0.01).结论：AD患者中单核细胞FcεRIγ亚基基因DNA甲基化调控FcεRIγ亚基基因的表达,进而影响FcεRI在细胞表面的表达.
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