【摘 要】
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对基因分离方法、已经分离的基因和基因工程在蔬菜作物育种上的应用进行了综述,并讨论了基因工程育种存在的问题和应用背景.
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对基因分离方法、已经分离的基因和基因工程在蔬菜作物育种上的应用进行了综述,并讨论了基因工程育种存在的问题和应用背景.
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通过对由具有6个无毒基因不同表现型的马铃薯晚疫病菌构建的4个混合池进行cDNA-AFLP分析、共获得85个与无毒基因相关的差异表达片段,其中与无毒基因Avr1、Avr2、Avr3-Avr10-Avr11、Avr4相关的差异表达片段分别为20,28,16和21个.将这些差异表达片段对20个晚疫病病菌个体进行无毒基因差异表达验证,得到无毒基因连锁群Avr3-Avr10-Avr11的修选片段1个,即A1
以榨菜子叶诱导的愈伤组织为外植体,建立了根癌农杆菌介导芜菁花叶病毒Hc-Pro基因在榨菜上的高效转化体系.通过对影响根癌农杆菌转化的几个因素的研究发现,继代次数、共培养温度以及共培养时间都对转化效率有一定的影响.继代2次,24℃下共培养2天时,转化效率最高,达1.92﹪.再生的部分植株经PCR检测表明,目的基因已经整合到榨菜基因组中,ELISA检测表明,转基因植株对芜菁花叶病毒有较好抗性.
本文采用细胞学和分子标记方法对甜瓜属人工异源四倍体(C.hytivus Chen and Kirkbride,2n=4x=38)的亲本染色体组间的交换重组进行了研究.通过对减数分裂中期I染色体行为观察,在108个花粉母细胞中有50个细胞具有多价体,占46.3﹪,染色体的平均构型为0.56Ⅰ+17.36Ⅱ+0.35Ⅲ+0.26Ⅳ+0.046Ⅴ+0.056Ⅵ,表明两亲本染色体组间发生了广泛的重组交换.
本研究以榨菜无菌苗子叶、茎段为外植体,研究通过不同的再生方法建立的再生体系.结果表明:带叶柄的叶培养在MS+0.5mg/LNAA+3mg/LBA上可直接诱导不定芽的产生,诱导率达100﹪.子叶培养在MS+0.25mg/LNAA+0.5mg/LBA+0.25mg/L2,4-D培养基上,可获得具有高分化能力的愈伤组织,愈伤组织在MS+1mg/LBA+0.2mg/LNAA培养基上的分化频率可达50﹪左右
以萝卜幼小花药与叶片为材料,初步建立了mRNA差异显示技术体系.4种提取总RNA方法中,改进的SDS/酸酚法比CTAB/酸酚法和SDS碱酚法更合适;改进的热硼酸法(HB)提取的RNA质量也较高,但所需时间较长,成本较高.以改进的SDS/酸酚法获得的RNA进行纯化后,其OD/OD在2.0~2.2之间,说明RNA样品蛋白或杂质较小;总RNA进行反转录与差异显示分析表明,高分辨力的cDNA片段在100~
以榨菜细胞质雄性不育系及其保持系基因组总DNA为模板,通过特异引物PCR方法克隆了榨菜atp A基因,基因大小为1524bp,推定编码507个氨基酸,进化分析表明atpA基因非常保守;进一步分析发现了不育系及其保持系atpA基因的5′UTR区存在差异,这为能量代谢相关基因与细胞质雄性不育性产生的关系提供了分子证据.
番茄是世界上最主要的蔬菜作物之一,叶霉病(Cladosporium fulvum Cooke)的发生和蔓延使保护地番茄生产受到严重影响,培育抗叶霉病的番茄品种是控制该病害最经济有效的方法.本研究根据Cf-5的基因序列设计特异扩增引物,以7个含有不同叶霉病抗病基因的品种为试材,扩增Cf-5基因2558~3523bp之间的单拷贝片段,7个材料均获得了966bp的特异扩增片段.用限制性内切酶Tag I对
本试验构建了以CaMV35s启动子驱动的含有番茄酸式胞外几丁质酶基因(CHI3)的植物表达栽体,通过冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株EHA105中,用叶盘法转化西瓜(Citrullus lanatus (Thunb.)Mansfeld var.citroides)栽培种"中育1号",通过卡那素抗性鉴定、CHI3基因的PCR检测、Southern斑点杂交
本文利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗根结线虫的Mi基因和抗番茄花叶病毒病的Tm基因紧密连锁的SCAR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段基本完全吻合,其中与Mi基因紧密连琐的SCAR1标记为共显性标记,抗感试材均产生750bp的特异片段,纯合和杂合抗病基因型存在TaqI酶切位点,酶切后分别产生了570bp、200bp和750bp、570bp、200bp的不同特异性片段,而
利用随机测序法,从结球甘蓝的cDNA文库中,分离到一个转录调控肿瘤蛋白基因类似物,命名为BoTCTP,该基因长828bp,包含一个504bp的完整开放编码框,编码168个氨基酸,在3端含有一个poly(A)尾巴.序列同源性比较发现,该基因与高等植物的TCTP基因有70﹪以上的同源性,其中与拟南芥的的TCTP基因的同源性最高,达到90.5﹪,而与动物,酵母的TCTP基因同源性较低.以BoTCTP为探