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目的:验证七氟烷预处理诱导远期神经保护效应,研究急性期激活的Nrf2-AREs信号通路在该效应中的作用,探寻激活该信号通路的上游机制.方法:使用小鼠tMCAO模型以证实七氟烷预处具有远期相神经保护作用;western、免疫荧光观察预处理后Nrf2表达、核转位情况;探究七氟烷能否激活Nrf2下游AREs;观察七氟烷对Nrf2的调控与抑制其负性因子Keap实现的关系.Nrf2基因敲除验证Nrf2缺失逆转七氟烷预处理神经保护作用.结果:(1)七氟烷预处理诱导远期相神经保护作用:再灌后1天、3天及7天,预处理组死亡率均低于对照组(P＜0.05).神经功能学评分:假手术组未有改变,预处理组评分在1天、3天及7天均高于同一时间点对照组(P＜0.05),TTC染色:7天时预处理组脑梗死容积率小于对照组(P＜0.05);(2)预处理上调Nrf2表达峰值,启动Nrf2核转位:westem及免疫荧光显示预处理组Nrf2水平高于单纯缺血组(P＜0.05),核浆分离western-blot显示,8h预处理组Nrf2细胞核转位增加(P＜0.05),共聚焦荧光定位表明预处理组Nrf2与半暗带神经元、星形胶质细胞存在核定位共标,且强度明显高于单纯缺血组.(3)预处理上调缺血后抗氧化酶表达及活性:七氟烷预处理后Nrf2下游AREs包括MnSOD、Trx、NQO1表达增加,抗氧化酶CAT、T-AOC及TSOD活性增加,而Nrf2下游Gpx91表达未有变化.(4)七氟烷预处理通过Keap1依赖途径调控Nrf2:western及免疫荧光结果显示,七氟烷预处理下调Keap1表达水平(P＜0.05 vs.con).(5)Nrf2基因敲除逆转预处理神经保护作用:与WT组相比,Nrf2-/-小鼠梗死容积率更大,神经行为学损伤更重,而七氟烷预处理无法减少Nrf2-/-小鼠脑梗死容积率,改善神经行为学评分.TUNLE染色显示,Nrf2-/-组预处理组与单纯缺血组阳性细胞计数结果无统计学差异.结论:七氟烷预处理通过下调缺血再灌注后Keap1表达,解离Nrf2,启动Nrf2核转位,激活下游抗氧化系统,诱导远期缺血耐受.