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Kunitz蛋白酶抑制剂是植物中存在较为广泛，也是研究较为深入的一类蛋白酶抑制剂，其生理功能至少包括了保护储存蛋白、调节内源蛋白酶的活性、保护个体免受昆虫和病原体的侵害、抑制癌细胞侵袭扩散、抗炎、抗真菌等作用。并已经应用到了抗虫性转基因植物和临床疾病治疗中。近年来，项目组在研究柑橘的抗冻机制过程中发现，在金柑冷驯化进程中，金柑叶片中有4种蛋白质MLP2-1、MLP2-2、MLP-1、PMLP2-1表达量上升，利用生物信息学方法对这四种蛋白质的结构和功能进行预测分析，包括其理化性质、二级结构、跨膜结构、基序、亚细胞定位、磷酸化位点等，推测出这四种蛋白质属于Kunitz蛋白酶抑制剂。本实验组对这四种蛋白质进行了功能研究，将MLP2-1基因进行了克隆，构建了p1300M-MLP2-1载体，并成功转入拟南芥，对得到的转基因拟南芥植株进行了抗冻性功能验证实验，主要对转基因拟南芥植株进行了抗冻表型观察、生理生化指标测定、转录组分析、基因编辑等实验，验证了MLP2-1基因具有抗冻功能。