【摘 要】
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目的 利用人肺腺癌细胞系A549及辐射抗性细胞模型,探讨MLL5和组蛋白甲基化蛋白在肺癌细胞辐射抗性中的作用.方法 肺腺癌A549细胞受10Gy X射线照射后,利用Real-time PCR法检测MLL5转录水平的变化；采用瞬时转染siMLL5片段的方法建立低表达MLL5的细胞模型(A549-siMLL5)；采用单次给予6 Gy,共5次累计30Gy的照射方法,建立A549的辐射抗性细胞模型(A54
【机 构】
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吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室,长春,130021
【出 处】
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中华医学会第八次全国放射医学与防护青年学术交流会
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目的 利用人肺腺癌细胞系A549及辐射抗性细胞模型,探讨MLL5和组蛋白甲基化蛋白在肺癌细胞辐射抗性中的作用.方法 肺腺癌A549细胞受10Gy X射线照射后,利用Real-time PCR法检测MLL5转录水平的变化；采用瞬时转染siMLL5片段的方法建立低表达MLL5的细胞模型(A549-siMLL5)；采用单次给予6 Gy,共5次累计30Gy的照射方法,建立A549的辐射抗性细胞模型(A549-RR)；Western Blot法检测A549和A549-RR细胞中的H3K4二甲基化、三甲基化水平和H3K27三甲基化水平；MTT法和流式细胞术检测受照后的A549-siMLL5在细胞增殖活性和细胞周期的变化.结果 10 GyX射线照射A549细胞后MLL5表达量24 h时明显高于假照组,至48 h时其表达量变化约为对照的2倍以上.辐射抗性细胞模型(A549-RR)的建立过程中,每一次照射均使MLL5表达量明显升高,并呈逐渐上升趋势.干扰MLL5表达的A549细胞受照后细胞的增殖活性下降,细胞的凋亡率明显增加,G2/M期比例显著增加而G1期减少.A549RR细胞与野生型A549细胞相比,H3K4me3明显降低,H3K27me3明显升高.结论 在A549细胞中电离辐射对MLL5具有正向调控作用；在A549细胞辐射抗性产生过程中,MLL5的mRNA逐渐升高,同时H3K4me3、H3K4me2的表达降低、H3K27me3升高；引起G2/M期阻滞、诱导细胞凋亡等细胞表型的变化.
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