论文部分内容阅读
小麦条锈菌(Puccinia striiformis West.,PSW)是一种世界性病害,严重威胁着小麦生产,小麦抗条锈病相关基因克隆可以为小麦的抗性育种提供基础.本文以甘肃省天水地区的小麦品种89-27和咸农四号为材料,利用mRNA差异显示(mRNA Differential Display ReverseTranscription PCR,DDRT-PCR)技术对小麦在正常和感染条锈菌的条件下基因表达的差异进行了分析,寻找可能与小麦抗条锈病过程的相关基因.3断锚定引物设计为T<,12>GC,与80个5断10聚体随机引物组合筛选特异cDNA条带.经多次重复实验后,小麦品种89-27显示24个差异片段,其中诱导、增强、抑制表达分别为3、13、8个;咸农四号显示22个差异片段,其中诱导、增强和抑制分别为4、8、10个.选择89-27中诱导表达的cDNA片段DD1、DD2(分别由随机有引物S118、S414筛出)克隆质粒载体(pUCm-T vecter)上,进行了序列测定,在Genbank生物信息数据库中利用BLAST进行序列同源比较分析.BLAST比较结果表明cDNA片段DD-1与Oryza sativa(japonica cultivar-group)cDNA clone有85﹪的同源性,与Oryza sativa(japonica cultivar-group)genomic DNA,chromosome 6,clone有85﹪的同源性.Oryza sativa(japonica cultivar-group)cDNA clone片段与CAP-trapper(分解代谢活化剂蛋白质的受体)有关,由此推测DD1编码的蛋白可能参与了小麦抗条锈病过程中相关的生理代谢活动.