药物成瘾是一个复杂的生物学现象，能导致严重的心理障碍和社会问题。神经系统在成瘾药物反复刺激下能发生适应性改变。药物诱导的神经元适应性变化，改变了这些神经元所在神经回路的功能，最终导致了包括耐受、依赖、敏化和药物渴求等药物成瘾的特征性行为的出现。药物成瘾是一个渐进的过程，成瘾性药物主要是作用于它的靶蛋白和基因和靶神经元，这个过程已研究得比较清楚。但是长期的药物滥用后在特殊类型的神经元发生的基因和蛋白水平的适应性改变，尤其是和药物成瘾的特征行为相关的那些适应性改变的机制还很不清楚。因此本课题初步研究了长期的成瘾性药物处理导致的行为学或基因表达的适应性改变。 1．内嗅皮层在环境线索诱发药物渴求中的作用 药物滥用相关的环境刺激能诱发滥用者的药物渴求状态。脑功能成像研究提示和药物滥用相关的环境刺激诱发的药物渴求，除了杏仁核外，可能还有其它脑区如内嗅皮层参与。为了研究内嗅皮层在环境线索诱导的药物渴求中的作用，我们检测了药物相关条件刺激对诱发大鼠可卡因觅药行为的作用和内嗅皮层失活对大鼠可卡因觅药行为的影响。 我们采用大鼠自给药模型结合双侧内嗅皮层埋管的方法，检测在药物相关环境线索刺激下内嗅皮层失活对大鼠觅药行为的影响。首先对大鼠进行每天4小时的自给药训练，大鼠踏板将获得静脉注射可卡因伴随一个持续10秒钟的声光刺激。一般大鼠训练七天左右可达到实验标准(≥30注射/4h)。然后动物分为三组：可卡因一条件刺激组，在有声光刺激的条件下，每5次踏板静脉给予可卡因200μg：生理盐水一条件刺激组在声光刺激的环境下每5次踏板静脉给予生理盐水50μl：生理盐水一无条件刺激组，在无声光刺激的条件下，每5次踏板静脉给予生理盐水50μ1，进行大鼠踏板行为的测试。结果显示，在没有可卡因的奖赏情况下声光刺激能增加大鼠的踏板行为。然后，用利多卡因(200μg/side)双侧微注射到内嗅皮层使其功能可逆性地失活，同时以生理盐水作对照组，然后检测大鼠的踏板行为。结果显示，内嗅皮层失活能特异性抑制声光刺激诱发的大鼠踏板行为，而对背景线索所诱发的大鼠踏板行为没有明显的影响。这些结果表明，药物相关的环境线索能引发大鼠的药物渴求行为，内嗅皮层失活能抑制由药物相关的环境线索所诱发的大鼠觅药行为。 2．阿片类药物对大鼠不同脑区NSF基因表达的调控 实验证明阿片类物质的成瘾与药物长期使用导致大脑的适应性改变有关。NSF(N-ethylmaleimide-sensitivefusionprotein)是在神经突触传导中起重要作用的蛋白，通过和SNARE复合物的作用，促使突触囊泡和突触前膜融合触发递质释放。近年来也发现NSF也是突触后致密成分的重要组成部分并且表现出重要的功能。例如，短暂性的脑缺血诱导，NSF蛋白会在突触后致密成分中聚集。抑制海马NSF蛋白的活性也能抑制长时程增强的形成。NSF蛋白和AMPA受体共定位于神经元的树突，影响AMPA受体在突触后膜的分布进而调节突触后神经元的活性。这些结果表明，NSF既可参与神经元突触前的递质释放又可调节突触后神经元的功能。但NSF是否参与阿片类物质导致的突触可塑性改变仍不清楚。 原位杂交结果显示NSFmRNA阳性细胞广泛分布于大鼠的运动皮层、感觉皮层、梨状皮层、海马的CAI区、CA3区和DG区、丘脑和中脑导水管周围灰质，尤其以在海马中的表达量最高。一次吗啡(10mg／kg)皮下注射，能显著上调大鼠脑内NSFmRNA表达水平，在处理4小时后NSFmRNA水平达到高峰，在大脑皮层增加约50％(p<0．01)、在海马增加约30％(p<0．05)、在中脑导水管周围灰质增加约20％(p<0．05)，而16小时后这三个脑区的NSFmRNA水平又恢复到0小时的水平。慢性吗啡处理，大鼠分为四组：NS-NS组，连续18次皮下注射0．3ml生理盐水；NS-Mor组，连续17次皮下注射0．3ml生理盐水用10rog／kg的盐酸吗啡替代；Mor-Mor组，连续18次皮下注射lOmg／kg的盐酸吗啡；MorNS组，连续17次皮下注射10mg／kg的盐酸吗啡第18次用0．3ml生理盐水替代。结果显示，NS-Mor组也能上调NSF的基因表达。和NS-NS组比较，在Mor-Mor组中4小时则观察不到大鼠脑内NSFmRNA表达水平改变。但在MorNS组中，4小时后在大脑皮层、海马和中脑导水管周围灰质NSFmRNA表达水平又上调到和NS-Mor组相近的水平。和Mor-Mor组比较，NSFmRNA表达水平在大脑皮层增加约20％(p