丹参素预处理对糖尿病脑梗死大鼠t-PA、PAI-1含量及mRNA表达的影响

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目的:观察丹参素预处理对糖尿病脑梗死大鼠脑组织纤溶酶原激活物及其抑制剂mRNA表达,及对血浆纤溶功能的影响,探讨其对糖尿病脑血管病的防治作用及可能作用机制。 方法:将50只健康雄性3月龄Wistar大鼠,体重250~300g,随机分为五组:1.正常假手术A组,2.糖尿病假手术B组,3.糖尿病脑梗死C组, 4.低剂量丹参素预处理糖尿病脑梗死D组,5.高剂量丹参素预处理糖尿病脑梗死E组,每组10只。B、C、D、E组制作糖尿病模型。成模后D、E组尾静脉分别注射丹参素5mg/(kg.d)、10mg/(kg.d)预处理,其余组用等量生理盐水对照。用药一周后行手术,A、B为假手术组,C、D、E组制作脑梗死模型。术后24小时取血、处死后冰浴中快速分离缺血侧距额极2~8mm脑组织。ELISA方法检测血浆组织型纤溶酶原激活物及其抑制剂t-PA、PAI-1含量,RT-PCR方法测定脑组织中两种纤溶酶原激活物及其抑制剂的基因表达,即t-PA与PAI-1、尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)与神经丝氨酸蛋白酶抑制剂(NSP)的mRNA表达。 结果: 1.糖尿病B组大鼠体内存在内皮细胞损伤,较正常A组释放的促纤溶因子t-PA含量明显下降(P<0.01),抑制因子PAI-1含量明显增加(P<0.01),且糖尿病脑梗死组纤溶功能紊乱加重,C组与B组相比t-PA含量进一步降低(P<0.01),PAI-1含量进一步升高(P<0.05)。丹参素预处理可明显改善糖尿病脑梗死大鼠血浆纤溶活性,D、E组与C组相比t-PA含量明显升高(P<0.05,P<0.01),PAI-1含量明显下降(P<0.05,P<0.01),作用强度随丹参素浓度的增大而增强。2.糖尿病B组大鼠脑组织内两种纤溶酶原激活物t-PAmRNA、u-PAmRNA表达较正常A组均明显下降(P<0.05),其抑制物PAI-1mRNA、NSPmRNA表达明显升高(P<0.01,P<0.05),脑组织纤溶功能下降,糖尿病脑梗死C组t-PAmRNA、u-PAmRNA表达较B组进一步降低(P<0.01),PAI-1mRNA、NSPmRNA表达更高(P<0.05,P<0.01),纤溶功能紊乱加重。丹参素预处理通过上调糖尿病脑梗死大鼠t-PAmRNA表达、抑制PAI-1mRNA表达,可提高鼠脑纤溶功能,D、E组与C组相比有显著性差异(P<0.01),且随丹参素浓度增大作用增强,但对u-PAmRNA、NSPmRNA的表达无显著影响(P>0.05)。 结论:丹参素预处理通过改善糖尿病脑梗死大鼠纤溶功能,可能对糖尿病脑梗死有防治作用。丹参素的作用可能与其具有活血化瘀、保护内皮细胞的功能有关。
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