目的:萎缩性胃炎(AG)是消化系统的常见病、多发病。近年来许多学者对该病进行了诸多研究和探讨,对萎缩性胃炎的诊断与治疗做出了巨大贡献。但本病尚缺乏疗效确切、副作用小的西药,而中医药辨证治疗本病具有独特的优势。解毒活血方由蒲公英、黄连、延胡索、当归、丹参等组成,为导师课题组成员创制的治疗萎缩性胃炎的方药,具有解毒活血,理气止痛的功效。该方经临床应用后,取得了显著疗效。本研究采用N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)法合并水杨酸钠法、热盐水法、饥饱失常法四因素法复制萎缩性胃炎大鼠模型。选用维霉素、三九胃泰及解毒活血方进行预防和治疗给药。通过观察各组大鼠胃黏膜病理形态、血浆胃动素(MTL)、血清胃泌素(GAS)的变化,从而探讨该方治疗萎缩性胃炎的作用机制。方法:健康wistar大鼠70只,雌雄各半,随机分为5组:正常组、模型组、解毒活血方治疗组、三九胃泰对照组、维酶素对照组,每组14只。正常组大鼠每天喂基础饲料,自由饮水,以蒸馏水2ml/只/天灌胃;其它组大鼠基础饲料喂养2天,停食1天(饥饱失常法),自由饮用浓度为160μg/ml的MNNG溶液,并用2%的水杨酸钠溶液和15%的NaCl溶液(加热至55℃)隔日交替灌胃,制作萎缩性胃炎大鼠模型。同时,解毒活血方组以51.7g生药/kg体重灌胃,每日1次;三九胃泰对照组以10g生药/kg体重灌胃,每日1次;维酶素对照组以0.99g生药/kg体重灌胃,每日1次。各组灌胃前后均禁食2小时。每天观察大鼠的一般情况。12周末随机抽取正常组和模型组大鼠各2只(雌雄各1只)处死,剖腹、取胃,在胃窦和胃体部各取一块组织,用10%福尔马林固定做光镜观察。光镜观察发现大鼠胃黏膜腺体萎缩,完成造模。最后一次灌胃后,禁食(不禁水)24小时,断头取静脉血5ml,置于含7.5% EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl的试管中混匀,4℃3000rpm离心10min,分离血浆,MTL待测;断头取静脉血5ml,4℃,3000rpm离心10min,分离血清,GAS待测。无菌操作剖腹取胃,沿胃大弯剪开,用冰生理盐水漂洗胃内容物,滤纸吸干,先肉眼观察胃黏膜的大体形态,再剪取胃窦部组织2块,每块约1mm3,4%多聚甲醛固定,逐级酒精脱水,常规石蜡包埋,切片,用HE染色,光镜下观察胃黏膜病理形态学变化。全部数据采用SPSS13.0统计软件处理,以均数±标准差(x±s)表示。各组均数的比较采用单因素方差分析,显著性差异水平以0.05、0.01为标准。结果:1各组大鼠的一般情况正常组大鼠精神好,行动敏捷,被毛光泽贴身,食量较大且稳定,大便颗粒状,尾色淡红。模型组大鼠精神状态差,萎靡不振,易受惊吓,行动迟缓,喜欢蜷缩聚堆生活,食欲不振,进食量明显减少,大便溏泻,皮毛杂乱无光泽,耳朵尾巴颜色深红发紫,体型较瘦弱。其他三组给药治疗后,一般情况明显好转,活动、摄食、毛发、大便性状、尾色等伴随给药时间增加而改善,尤其是解毒活血方治疗组的大鼠食量明显多于其余四组。实验期间,解毒活血方组、三九胃泰组和维霉素组分别死亡大鼠2只,死亡原因可能是灌胃及药物提纯等原因。2解毒活血方对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜病理形态学的影响2.1大体观察正常组大鼠胃黏膜呈粉红色,有光泽,被覆较多黏液,黏膜皱襞表面光滑,走形规则,胃壁弹性良好。模型组大鼠胃黏膜色泽苍白,黏膜变薄,并可见黏膜下血管显露,皱襞平坦或走形紊乱,胃壁弹性减弱。三九胃泰对照组及维霉素对照组亦有不同程度的胃黏膜色泽苍白,黏膜变薄,胃壁弹性减弱的表现,但优于模型组。解毒活血方组大鼠胃黏膜肉眼观察与正常对照组无明显差别,显著优于各对照组。2.2光学显微镜观察(HE染色)光学显微镜观察,正常组胃黏膜上皮完整、腺体排列规则,黏膜肌层较薄。模型组上皮不完整,黏膜变薄,多数腺体结构排列紊乱,黏膜腺体有不同程度的萎缩或消失,黏膜肌层增厚,并向固有层延伸。解毒活血方组胃黏膜上皮相对完整,黏膜厚度均匀,腺体排列较规整。三九胃泰组肌层相对较薄,萎缩的腺体较少。维霉素组肌层明显增厚,腺体萎缩较多。3解毒活血方对萎缩性胃炎大鼠血浆胃动素含量的影响与正常组比较,模型组大鼠血浆MTL含量明显下降,具有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,解毒活血方组、三九胃泰组及维酶素组MTL含量均明显升高,具有统计学意义(P<0.01);解毒活血方组与三九胃泰组比较MTL含量明显升高,具有统计学意义(P<0.01);解毒活血方组与维酶素组比较MTL含量明显升高,具有统计学意义(P<0.01)。4解毒活血方对萎缩性胃炎大鼠血清胃泌素含量的影响与正常组比较,模型组大鼠血清GAS量明显下降,具有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,解毒活血方组、三九胃泰组及维酶素组GAS含量均明显升高,具有统计学意义(P<0.01);解毒活血方组与三九胃泰组比较GAS含量明显升高,具有统计学意义(P<0.01);解毒活血方组与维酶素组比较GAS含量明显升高,具有统计学意义(P<0.01)。结论:1解毒活血方能显著改善萎缩性胃炎大鼠胃黏膜病理形态学变化,减轻胃黏膜损伤,具有保护胃黏膜的作用。2解毒活血方能够显著提高胃动素的含量,促进胃的运动,以利于胃黏膜修复。3解毒活血方能够显著提高胃泌素的含量,促进胃分泌与胃运动,并对胃黏膜具有营养作用。