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植物细胞即使在正常的生理条件下也产生大量的活性氧(reactive oxygen species,ROS或active oxygen species),在环境发生变化时,如高温、寒冷、干旱、农药污染等,各种ROS的产生速率也会大大的增加。产生活性氧的植物细胞器有叶绿体、线粒体、过氧化物酶体、乙醛酸循环体、内质网、微粒体、细胞膜及细胞壁等。这些ROS包括O2·-、H2O2、·OH、氢过氧基(hydyoperoxyl radical,HO2·)、烷氧基(alkoxy radical,RO·)、烷过氧基(peroxy radical,ROO·)、氢过氧化物(hydroperoxide,ROOH)、单线态氧(singlet oxygen,1O2,)、次卤酸(HOX)和臭氧(O3)等。ROS对机体是有毒的,它们能破坏正常细胞的DNA、蛋白质和膜脂等,所以细胞中ROS水平必须受到严格的控制,植物细胞具有完整的ROS防御系统,它是由抗氧化酶和抗氧化剂组成的。 本文通过研究甲胺磷胁迫下小白菜中几种抗氧化酶如超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)、细胞色素P450酶系的活性变化以及小分子抗氧化物质谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量变化,并通过测定小白菜细胞内总ROS和总抗氧化能力的变化,来初步筛选几种对有机磷敏感的生化标志物。然后选择几个敏感指标,初步研究其对甲胺磷胁迫的应答机理,来进一步阐明并定位有机磷对小白菜的胁迫影响机制。 1.甲胺磷胁迫下小白菜中几种抗氧化物的变化研究 以0.5g/m2浓度的甲胺磷喷洒小白菜后,测定7d内其体内抗氧化酶SOD、CAT、GPX的活性及小分子抗氧化物质GSH和系统总抗氧化能力的变化规律。结果表明:喷药后2-6d小白菜中SOD、CAT、GSH都高于对照;GPX的活性在2-3d低于对照,随后趋于稳态;总抗氧化能力与对照相比基本处于稳定状态。第7d各指标都又还原到与对照接近。说明甲胺磷胁迫下小白菜体内产生了氧自由基,进而诱导细胞内防御活性氧自由基毒害的物质产生,5~6d后机体恢复正常。实验为食品卫生检验提供了一个参考标准。 2.甲胺磷对小白菜幼苗细胞色素P450酶系的诱导作用及其光谱特征 用4.8g/L,0.96g/L,0.096g/L3个不同浓度的甲胺磷浇灌小白菜,试验结果表明,小白菜幼苗在甲胺磷诱导下,微粒体提取上清液和微粒体蛋白含量与对照组相