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目的：胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，目前对胃癌的治疗措施是以手术为主导的综合治疗。但由于胃癌细胞具有较强的增殖及抗凋亡能力且进展迅速，故目前对胃癌的治疗结果还远不能令人满意。因此，寻找影响胃癌细胞增殖、凋亡的新基因有重要意义。锌指蛋白（zinc fingerproteins,ZNFs）家族成员作为转录调控因子，可直接调节多种基因的表达，很多成员与恶性肿瘤的增殖、凋亡有关。锌指蛋白139（zinc finger protein139,ZNF139）是本研究所前期发现与胃癌关系密切的因子，但其是否能调节胃癌增殖凋亡未见报道。RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术是通过抑制显性突变致癌基因的表达、扩增、易位而成为从反面研究目的基因功能的一种有效方法。本实验以人工合成质粒ZNF139-siRNA转染胃癌细胞株SGC7901，采用四氮唑蓝（MTT）比色法测定各处理组胃癌细胞活力，绘制转染胃癌细胞的时间-剂量曲线；流式细胞术（FCM）的方法检测细胞凋亡率及细胞周期变化；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测ZNF139、Cyclin D1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2在各处理组中的表达情况，从而探讨其在胃癌增殖、凋亡调控中发挥的作用及机制。方法：以人胃癌细胞株SGC7901为研究对象，人工合成质粒介导的ZNF139-siRNA及非特异性siRNA载体。实验分为空白对照组（SGC7901）、实验组（转染ZNF139-siRNA-Ps1的SGC7901）、阴性对照组（转染ZNF139-siRNA-PC的SGC7901）。首先以不同剂量的siRNA转染胃癌细胞SGC7901，MTT法测定不同剂量siRNA转染后的细胞活力，绘制胃癌细胞的时间-剂量曲线，以得到siRNA干扰的最适时间和剂量。用此条件转染胃癌细胞后得到SGC7901/ZNF139-siRNA细胞后，流式细胞术分别测定3组细胞不同时间的凋亡率及细胞周期变化。最后分别提取各组细胞总mRNA，RT-PCR法检测3组细胞内ZNF139、Cyclin D1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2mRNA表达情况，最后应用SPSS13.0统计软件单因素方差分析、Spearman相关等分析其表达。结果：1三组凋亡率及细胞周期变化1.1各组凋亡情况比较流式细胞术显示实验组在ZNF139-siRNA-Ps1质粒转染人胃癌细胞SGC790124h、48h、72h后，均出现明显的凋亡峰，凋亡率分别为（4.823±0.685%,16.827±3.507%,20.107±3.305%），空白对照组与阴性对照组未见凋亡峰出现。经统计学分析，实验组3个不同处理时间凋亡率有统计学差异（P=0.001），空白对照组和阴性对照组凋亡率无统计学差异(P=0.202，P=0.904)。实验组与空白对照组不同处理时间均有统计学差异（24h：t=-8.826P=0.012，48h：t=-7.505P=0.016，72h：t=-9.425P=0.008）。1.2各组细胞的细胞周期分布比较在处理24小时，三组细胞的细胞周期变化无统计学差异（F=0.388，P=0.867）。处理48小时三组细胞的周期发生改变F=3.519，P=0.052，实验组G0/G1期细胞数增加有统计学差异（P=0.010），其细胞比例（62.100±1.908%）,S期细胞减少有统计学差异(P=0.005)，其细胞比例（25.767±0.851%）；G2/M期细胞数改变无统计学意义（P=0.811）；三组细胞增殖指数分别为（48.033±1.563%,37.867±2.108%,47.36±2.3447%）；实验组G0/G1期和S期与空白对照组有明显差异（t=-7.253P=0.002，t=6.480P=0.003）。处理72小时三组细胞的周期亦有明显差异F=5.900，P=0.013，实验组G0/G1期细胞数增加（P=0.008），其比例为（60.100±3.365%）,S期细胞减少(P=0.006)，其比例为（28.767±1.234%）；G2/M期细胞数改变无统计学意义（P=0.238）；三组细胞增殖指数分别为（48.500±1.153%,39.900±365%,47.734±1.704%）；实验组G0/G1期和S期与空白对照组有明显差异（t=-4.188P=0.014，t=3.483P=0.025）。1.3各组细胞的细胞生长抑制率比较构建的ZNF139-siRNA质粒通过荧光显微镜观察转染率约90%左右，且ZNF139-siRNA-Ps1对胃癌SGC7901细胞生长有抑制作用，0.8μg/ml质粒转染48小时为最适条件。质粒转染24h、48h、72h后抑制率约为（22.21%，46.48%，45.81%）；而ZNF139-siRNA-PC非特异性质粒则不能沉默ZNF139的表达，质粒转染24h、48h、72h后抑制率约为（8.64%，8.42%，1.08%）。2三组细胞中ZNF139、Cyclin D1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2mRNA的表达情况2.1空白对照组SGC7901与实验组SGC7901细胞中ZNF139、CyclinD1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2mRNA均有表达。且在实验组SGC7901细胞中ZNF139、CyclinD1、PCNA、Bcl-2mRNA表达明显低于空白对照组SGC7901细胞，Caspase-3表达明显高于空白对照组（P <0.05）。2.2空白对照组SGC7901与阴性对照组SGC7901细胞中ZNF139、CyclinD1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2mRNA均有表达，且两组细胞中各基因mRNA的表达均无统计学差异（P>0.05）。3三组细胞中ZNF139与Cyclin D1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2mRNA表达的相关性3.1在空白对照组SGC7901细胞中ZNF139的表达与Cyclin D1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2正相关（r=0.997P=0.048；r=0.998P=0.041；r=0.998P=0.041；r=0.997P=0.049）。3.2在实验组SGC7901细胞中ZNF139的表达与Cyclin D1、PCNA、Bcl-2正相关（r=0.997P=0.049；r=0.997P=0.046；r=0.997P=0.045），与Caspase-3负相关（r=-0.998P=0.038）。3.3在阴性对照组SGC7901细胞中ZNF139的表达与Cyclin D1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2正相关（r=0.997P=0.045；r=0.997P=0.049；r=0.9997P=0.016；r=0.998P=0.036）。结论：1对人胃癌细胞株SGC7901的研究证实，成功构建的ZNF139-siRNA-Ps1质粒能特异性沉默SGC7901细胞系中转录因子ZNF139表达，抑制肿瘤细胞生长，促进细胞凋亡，使细胞阻滞在G0/G1期。2在转染ZNF139-siRNA-Ps1质粒的胃癌细胞SGC7901细胞中总mRNA中CyclinD1、PCNA、Bcl-2表达下调、Caspase-3表达上调；且ZNF139的表达与CyclinD1、PCNA、Bcl-2正相关，与Caspase-3负相关，表明转录因子ZNF139是通过调节CyclinD1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2等相关因子共同完成胃癌细胞增殖凋亡基因调控过程的。