论文部分内容阅读
目的: 1.以氪激光诱导建立BN大鼠脉络膜新生血管(Choroidal neovascularization,CNV)动物模型,阐述其可用性。2.观察血管生成素-2及其受体Tie-2,和VEGF-B及其受体Flt-1在实验性CNV中的表达,探讨其在CNV中的作用机制。3.并探讨内皮抑素(Endostatin)对实验性CNV的抑制作用。 方法: 1.对10只BN大鼠应用氪激光(波长647nm)对实验眼视网膜进行光凝,功率360mW、光斑直径50μm、曝光时间0.05s,创建CNV模型。于光凝后7d,14d,28d,56d和84d行FFA检查。光镜下对HE染色切片进行CNV形态学改变的评价。2.对15只BN大鼠应用氪激光光凝视网膜,建立CNV模型,设为实验组,对另15只BN大鼠只散瞳不光凝。分别于光凝后7d,14d,28d,56d和84d应用免疫组化和原位杂交方法,检测各组大鼠光凝区和正常视网膜中Ang-2及其受体Tie-2、VEGF-B及其受体Flt-1在蛋白和分子水平的表达,分析Ang-2、VEGF-B及其受体在CNV形成中的作用机制。对实验结果进行半定量分析。3.对12只(24眼)BN大鼠双眼进行氪激光光凝,建立CNV模型,随机分为治疗组及对照组各6只(12眼),治疗组给予endostatin 100μl(0.5mg/ml),对照组给予BSS100μ1球后注射,测定CNV发生率及面积,免疫组化检测FⅧR:Ag阳性表达水平。对实验结果进行半定量分析。4.实验数据以均值±标准差表示,行方差分析和t检验等统计学处理。 结果: 1.FFA光凝斑盘状荧光素渗漏,证实CNV形成。光凝后7d可见荧光素渗漏,可持续至光凝后84d。2.Ang-2mRNA在正常BN大鼠视网膜无表达。实验眼光凝后7d,在激光损伤区Ang-2mRNh表达于视网膜神经节细胞层、内核层、外核层缺损区、视网膜和脉络膜血管内皮细胞,其