硼酸调控的pH响应型多糖纳米药物载体的设计、制备及表征

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刺激-响应型药物传递系统不仅能提高疏水性药物的溶解性,还具有在特殊环境的病灶部位释放药物,从而改善药物在体内分布,增强治疗作用,并降低毒副反应的效果。有研究表明,硼酸在弱碱性环境下会自发地与含邻二醇结构的化合物结合,形成在酸性环境下可断裂的硼酸酯键。在此基础上,本研究设计并制备了以硼酸为桥接段,具有pH响应功能的药物传递系统,用于抗肿瘤药物的靶向传递和响应释放。本论文主要包括以下几方面内容:(1)双重药物包载胶束的制备及表征采用“一锅法”将葡聚糖(Dex)、硼酸衍生化甲氨蝶呤(MTX-PBA)和阿霉素(DOX)混溶于有机溶剂中,然后通过简单对水透析,得到包载两种药物的胶束。结果显示,采用“一锅法”的胶束产率为78.2%,比传统方法的胶束产率提高约30%,并同时提高了两种药物的包载效率。透射电镜(TEM)观测胶束具有球状结构,且均匀分散,平均粒径约为65 nm。酸性环境(pH 5.0)下两种药物的释放速率均明显加快,24 h内药物的释放率分别较生理环境(pH 7.4)下的释放率提高了1.75倍(MTX-PBA)和1.56倍(DOX)。通过胶束来传递两种药物,MTX对HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50值)从4.14 mg/L降至0.4 mg/L,而DOX从0.46 mg/L降至0.16 mg/L,表现出协同抗肿瘤效果。(2)KGP纳米粒子的制备及表征制备了三种K5多糖-棉酚缀合物(KGP),其中棉酚(GP)取代度分别为4.20%(KGP1)、11.43%(KGP2)和14.40%(KGP3)。KGP可在水中自组装形成纳米粒子,DLS测得其平均粒径分别为320.2 nm、221.6 nm和141.2 nm。以KGP3作为药物载体,其在体外表现出酸敏感释放GP的行为,12 h内GP在pH 5.0介质中的释放率较pH 7.4下的释放率提高约2.8倍。并且KGP3可提高GP的传递选择性,其对PC-3癌细胞的IC50值低于COS-7正常细胞。(3)DGEA-KGP纳米粒子的制备及表征制备了荧光素标记的K5多糖以及用靶向肽DGEA功能化修饰的K5多糖衍生物,并分别用荧光显微镜和流式细胞仪分析了经DGEA修饰前后的K5多糖进入PC-3细胞的差异。通过对KGP进行DGEA功能化修饰制得DGEA-KGP缀合物,其对PC-3细胞的毒性高于GP和KGP,表现出靶向且对PC-3细胞增殖的抑制作用增强的效果。综上所述,本研究制备的硼酸调控的pH响应型多糖纳米药物载体,在细胞水平的评价实验中表现出了良好的靶向传递和响应释放药物的效果,在药物传递领域具有广泛的应用前景。
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