[研究背景和目的]胆囊癌(Gallbladder cancer, GBC)是胆囊最常见和侵袭性强的恶性肿瘤之一。由于早期胆囊癌缺乏典型的临床表现,其5年生存率低,预后差。大多数患者在诊断时已属于晚期,从而失去了根治性手术的机会。因此,GBC的早期诊断是很重要的。目前,胆囊癌的诊断主要依靠非侵入性的辅助影像学检查和创伤性检查,如腹腔镜检查和活检。然而,尚缺乏理想的肿瘤标志物用于GBC的诊断和预后的评价。肿瘤标志物如癌胚抗原(CEA),糖类抗原125(CA125),糖类抗原242(CA242)和糖类抗原199(CA199)已被广泛地应用于各种不同类型的癌症诊断,如肝癌,胃癌,大肠癌和胰腺癌。然而,当这些标志物用于胆囊癌的诊断时,诊断结果却不一致。最近的一项研究报道,鞘氨醇1-磷酸受体1(S1P1)过表达或内质网蛋白29(ERp29)缺失与肿瘤的发生、发展密切相关,并可能成为早期检测胆囊腺癌的潜在生物标志物。因此,我们推测肿瘤标志物联合检测使用能否避免不一致,从而提高对胆囊癌诊断的敏感性。胆囊癌患者术后死亡的主要原因是术后肿瘤复发和转移。为了实现全面和准确认识胆囊癌术后复发和转移的情况,人们已经进行了巨大的努力,来探索更有效的临床预测方法。但是,由于经济与技术条件的限制,不能对所有个体的肿瘤相关指标系统全面地检测,因此,特异性肿瘤标志物的联合检测就具有非常重要的临床研究价值。本研究的主要目的是探讨肿瘤标志物CA199、CA242、CA125和CEA联合检测是否可以增加GBC诊断的敏感性并分析影响胆囊癌患者生存和复发的临床预后因素。[研究方法]通过第二军医大学附属东方肝胆外科医院检验中心,采用电化学免疫仪对234例入选本研究受试者血清CA199、CA242、CA125和CEA水平进行检测。其中包括2010年1月至2012年9月之间就诊于上海市同济大学附属杨浦医院和第二军医大学附属东方肝胆外科医院的GBC患者78例(其中男性30例,女性48例)和78例良性胆囊疾病患者(胆囊炎,胆囊息肉和胆囊结石),以及78例在同一医院接受体检的健康正常对照人群。正常参考值如下：CEA≤10μg/l, CA125≤35U/ml, CA242≤15U/ml和CA199≤39U/ml。并在术前和术后对CA199、 CA242、CA125和CEA血清检测水平和阳性率进行了分析和评估。所有患者的肿瘤大小、血清CA199、CA242、CA125和CEA的检测值、术后生存时间均输入数据库。组间计量资料用t检验进行比较,计数资料用χ2检验。ROC曲线用于上述指标对于GBC诊断的敏感性和特异性的评估。并对随访患者进行生存分析,包括生存时间曲线和Cox比例风险模型多因素生存分析来评估影响胆囊癌患者术后预后的独立因素。[研究结果]1.健康对照组与胆囊良性疾病组之间在CA199、CA242、CA125和CEA四种标志物平均血清水平和检测阳性率方面差异无统计学意义(P>0.05),但GBC组与其他两组之间在CA199、CA242、CA125和CEA四种标志物平均血清水平和检测阳性率方面存在显著差异,并具有统计学意义(P<0.01)。在胆囊癌组患者中血清CA199、CA242、CA125和CEA水平在年龄和性别方面不存在显著差异(P>0.05)。胆囊癌组患者血清CA199、CA242、CA125和CEA水平在GBC位于胆囊颈部者明显高于胆囊癌位于胆囊底部者。此外,胆囊癌组患者血清CA199、CA242和CA125水平在GBC的不同临床病理分期,肿瘤大小和分化方面也存在显著差异。2.根据GBC患者的不同临床分期阶段对四个血清肿瘤标志物的敏感性分析表明,CA199、CA242和CA125的敏感性随着胆囊癌临床分期的进展逐渐升高。胆囊癌组患者血清中CA199、CA242和CA125水平在病理分期ⅣA,IVB期与Ⅱ期之间存在差异,并具有统计学显著意义(P<0.05)。单个肿瘤标志物诊断胆囊癌时,CA199的敏感性最高(72.7%),而CA242的特异性最高(98.7%)。CA242可被视为GBC在早期阶段浸润的肿瘤标志物之一。联合检测CA199、CA242和CA125时诊断准确率最高(69.2%)。联合检测可以提高GBC诊断的特异性,但不能改善诊断的敏感性。CA199和CA242诊断敏感性随GBC生长阶段的进展和淋巴结远处转移而增高(P<0.05)。3.78例GBC患者术后随访6～12个月(平均8个月)。30例患者术后完整随访1年,其中6例患者出现复发,24例没有出现复发。在术后6个月时,胆囊癌复发组患者血清CA199、CA242和CA125水平明显高于非复发组(P<0.01)。非复发组患者血清CA199、CA242和CA125水平较术前胆囊癌组患者明显降低,并具有临床上的统计学差异(P<0.01)。使用Cox比例风险模型进行多因素生存分析表明,胆囊颈部胆囊癌和血清CA199表达水平是影响胆囊癌患者预后的独立预后因素。[研究结论]1.血清CA199、CA242和CA125的表达水平对于评估胆囊癌患者的淋巴结转移,监测复发和评价肿瘤临床分期具有重要的临床应用价值。2.联合检测血清肿瘤标志物CA199、CA242和CA125表达水平对GBC的诊断、疗效评估及预后预测具有非常重要的应用价值。3.CA242可作为诊断GBC早期阶段浸润的肿瘤标志物。4.胆囊颈部胆囊癌和血清CA199表达水平是影响胆囊癌患者术后生存时间的独立预后因素。